Diferencia clave: cultivo celular primario frente a secundario
Antes de discutir la diferencia entre cultivo celular primario y secundario, primero definamos brevemente qué es el cultivo celular. El cultivo celular es el proceso de extracción de células de un animal o planta y su posterior crecimiento en un entorno controlado artificialmente. Las células podrían extraerse directamente del tejido y disgregarse mediante métodos enzimáticos o mecánicos o podrían derivarse de un cultivo que ya se haya establecido. La diferencia clave entre el cultivo celular primario y secundario es que las células para el cultivo celular primario se obtienen directamente de un tejido animal o vegetal, mientras que las células para el cultivo celular secundario se obtienen de un cultivo primario ya establecido. Por lo tanto, la cultura secundaria es una nueva cultura originada a partir de la cultura primaria.
Veamos más a fondo el significado de cultivo celular primario y secundario para diferenciarlos mejor.
¿Qué es el cultivo celular primario?
El cultivo celular primario es la disociación de células de un tejido parental animal o vegetal a través de medidas enzimáticas o mecánicas y el mantenimiento del crecimiento de las células en un sustrato adecuado en recipientes de vidrio o plástico en condiciones ambientales controladas. Las células en cultivo primario tienen el mismo cariotipo (número y aspecto de los cromosomas en el núcleo de una célula eucariota) que las células del tejido original. El cultivo de células primarias podría clasificarse en dos según el tipo de células utilizadas en el cultivo.
Célula adherente o dependiente de anclaje: estas células requieren un accesorio para crecer. Las células adherentes generalmente se derivan de los tejidos de los órganos, por ejemplo, del riñón, donde las células están inmóviles e incrustadas en el tejido conectivo
Células de suspensión o independientes de anclaje: estas células no requieren un accesorio para crecer. En otras palabras, estas células no se adhieren a la superficie del recipiente de cultivo. Todos los cultivos en suspensión se derivan de células del sistema sanguíneo; por ejemplo, los linfocitos de los glóbulos blancos se suspenden en el plasma
Las células derivadas de cultivos primarios tienen una vida útil limitada. Las celdas no se pueden mantener indefinidamente debido a varias razones. El aumento del número de células en el cultivo primario conducirá al agotamiento del sustrato y los nutrientes. Además, la actividad celular aumentará gradualmente el nivel de metabolitos tóxicos en el cultivo inhibiendo un mayor crecimiento celular.
En esta etapa, se debe realizar un cultivo secundario o subcultivo para asegurar el crecimiento celular continuo.
¿Qué es el cultivo celular secundario?
Como se describió anteriormente, cuando las células en cultivos adherentes ocupan todo el sustrato disponible o cuando las células en cultivos en suspensión superan la capacidad del medio para soportar un mayor crecimiento, la proliferación celular comienza a reducirse o cesar por completo. Para mantener una densidad celular óptima para un crecimiento continuo y para estimular una mayor proliferación, el cultivo primario debe subcultivarse. Este proceso se conoce como cultivo celular secundario.
Durante el cultivo celular secundario, las células del cultivo primario se transfieren a un recipiente nuevo con medio de crecimiento fresco. El proceso implica eliminar los medios de cultivo anteriores y disociar las células adheridas en cultivos primarios adheridos. El cultivo celular secundario se requiere periódicamente para proporcionar a las células espacio de crecimiento y nutrientes frescos, prolongando así la vida de las células y expandiendo una cantidad de células en el cultivo.
Secundario El cultivo de un determinado volumen de un cultivo primario en un volumen igual de medio de cultivo fresco permite el mantenimiento a largo plazo de las líneas celulares. Se practica el cultivo secundario en un volumen mayor de medio de crecimiento fresco para aumentar el número de células, por ejemplo, en procesos industriales o experimentos científicos.
¿Cuál es la diferencia entre el cultivo celular primario y el cultivo celular secundario?
Como ahora hemos entendido los dos términos por separado, compararemos los dos para encontrar otras diferencias entre ellos.
Cuándo usar cultivo celular primario y/o secundario
Esto depende de lo que quieras aprender y del tipo de experimento que realices.
Cultivo celular primario: Este es el proceso que se utilizará para cultivar células del tejido parental en cuestión. Las células en cultivo primario tendrán una vida útil finita debido al agotamiento del sustrato y los nutrientes y la acumulación de toxinas, con el crecimiento de la población. El cultivo primario, a pesar de las técnicas de separación utilizadas en el proceso de aislamiento, puede contener varios tipos de células. Sin embargo, esto podría no ser un problema en todo tipo de experimentos y, en tales casos, solo se puede utilizar el cultivo primario.
Cultivo celular secundario: por lo general, el número de células obtenidas del cultivo primario es insuficiente en los experimentos. El cultivo celular secundario brinda la oportunidad de expandir la población celular y también prolongar la vida útil. Permite una mayor selección de células con el uso de un medio selectivo y permite la uniformidad genotípica y fenotípica en la población. Este proceso se utiliza para generar cultivos replicados para la caracterización básica, la conservación y la experimentación.
Semejanza con el tejido de los padres
Cultivo celular primario: Las células para el cultivo celular primario se obtienen directamente de un tejido animal o vegetal. Por lo tanto, las células en cultivo primario se asemejan mucho a su tejido parental y, en consecuencia, la respuesta biológica puede estar más cerca de una situación in vivo que la de un cultivo celular secundario.
Cultivo celular secundario: El cultivo celular secundario se origina a partir de un cultivo celular primario. Aunque el subcultivo prolonga la vida útil de las células, existe la posibilidad de que después de algunas fases, las células se transformen o pierdan el control de no dividirse más de una cierta cantidad de veces. Esto podría deberse a mutaciones o alteraciones genéticas en las células primarias durante el subcultivo. Por ejemplo, algunos microorganismos tienden a adaptarse a las condiciones de cultivo, que en su mayoría son diferentes de su entorno natural, alterando su biología.
Proceso de Cultivo – Obtención de Células
Cultivo celular primario: En el cultivo celular primario, el tejido animal o vegetal pasará por fases de enjuague, disección y desagregación mecánica o enzimática. El tejido desagregado contendrá una variedad de diferentes tipos de células, y esto puede requerir la adopción de una técnica de separación para aislar las células de interés.
Cultivo celular secundario: En el cultivo celular secundario, si el cultivo primario es un cultivo adherente, el primer paso es separar las células del accesorio (superficie del recipiente de cultivo) por medios mecánicos o enzimáticos. Luego, las células deben separarse entre sí para formar una suspensión de una sola célula.
Número de células en cultivo
Cultivo de células primarias: no es deseable tener una suspensión absoluta de una sola célula, ya que muchas células primarias sobreviven mejor en grupos pequeños.
Cultivo celular secundario: Es suficiente generar una suspensión de una sola célula.
Duración de la vida de la cultura
Cultivo celular primario: Los cultivos celulares primarios tienen una vida útil finita. Como se explicó anteriormente, esto se debe a que el crecimiento de las células agota el sustrato y los nutrientes y conduce a la acumulación de metabolitos tóxicos. Como resultado, la tasa de crecimiento de las células disminuye gradualmente, lo que lleva a la muerte de las células.
Cultivo celular secundario: El cultivo celular secundario prolonga la vida útil de las células. El subcultivo periódico puede producir células inmortales a través de la transformación o alteración genética de las células primarias.
Riesgo de contaminación
Cultivo celular primario: Los cultivos celulares primarios son más difíciles de cuidar. Generalmente, los cultivos de células primarias necesitan una rica mezcla de aminoácidos, micronutrientes, ciertas hormonas y factores de crecimiento. Como resultado, el riesgo de contaminación en cultivos celulares primarios es mayor que en cultivos celulares secundarios.
Cultivo celular secundario: Los cultivos celulares secundarios son relativamente fáciles de mantener y el riesgo de contaminación es menor que los cultivos celulares primarios.
En este artículo, hemos intentado comprender los términos cultivo celular primario y cultivo celular secundario seguido de una comparación para res altar las diferencias clave entre ellos. La diferencia básica radica en cómo se derivan las células del cultivo; las células para el cultivo celular primario se obtienen directamente de un tejido animal o vegetal, mientras que las células para el cultivo celular secundario se obtienen de un cultivo primario ya establecido.
