La diferencia clave entre el híbrido de levadura uno y el híbrido de levadura dos es que el híbrido de levadura uno es un ensayo in vitro para analizar las interacciones ADN-proteína, mientras que el híbrido de levadura dos es un ensayo in vitro para analizar las interacciones proteína-proteína.
Estudiar las interacciones entre las moléculas celulares puede ayudar a definir los sitios de reconocimiento involucrados en la expresión génica y las vías de las proteínas. Las interacciones entre el ADN y las proteínas son parte integral de los procesos celulares, como las modificaciones del ADN y la regulación transcripcional, etc. Por otro lado, las interacciones entre las proteínas y las proteínas desempeñan funciones vitales en los procesos celulares, como la replicación, la transcripción, la traducción y la transducción de señales. Por lo tanto, es de vital importancia identificar estas interacciones de moléculas celulares a través de diferentes ensayos. El híbrido de levadura uno y el híbrido de levadura dos son dos ensayos in vitro para analizar las interacciones ADN-proteína y proteína-proteína.
¿Qué es Yeast One Hybrid?
Yeast one hybrid (Y1H) es un ensayo in vitro para analizar las interacciones intracelulares entre el ADN y la proteína. Este método fue establecido por primera vez por Wang y Reed en 1993. Desde entonces, ha mostrado un mayor poder en la investigación biológica. En este ensayo, hay dos componentes principales: cebo de ADN y presas proteicas.
Figura 01: Yeast One Hybrid
En el procedimiento, primero se clona una secuencia de ADN (cebo de ADN) aguas arriba de dos reporteros diferentes (HIS3, LacZ). Estas construcciones indicadoras se integran en el genoma de una cepa de levadura. Los factores de transcripción se toman como presas proteicas. Los factores transcripcionales se fusionan con el dominio de activación transcripcional (AD) del factor transcripcional Gal4 de levadura para producir proteínas híbridas. Toda esta proteína híbrida se integra en un plásmido antes de introducirla en la cepa de levadura. Después de la introducción del plásmido recombinante, cuando el factor transcripcional interactúa con el fragmento de ADN, la fracción AD activa la expresión del gen indicador (HIS3 o LacZ). La secuenciación de los plásmidos permite la identificación del factor transcripcional que puede unirse al fragmento de ADN. Recientemente, se utilizó un método híbrido de levadura para investigar el diagnóstico de enfermedades. Por lo tanto, en el futuro, este ensayo se utilizará más ampliamente en investigaciones científicas y tratamientos médicos.
¿Qué es Yeast Two Hybrid?
Yeast two hybrid (Y2H) es un ensayo in vitro para analizar las proteínas intracelulares y las interacciones entre proteínas. Este método fue encontrado originalmente por Stanley Fields y Ok-Kyu Song en 1989. Esta técnica detecta interacciones proteína-proteína utilizando el factor de transcripción Gal4 de la levadura.
Figura 02: Dos híbridos de levadura
En este método, primero se construyen dos fusiones (híbridos) usando proteínas de interés: fusionando una proteína con el dominio de unión al ADN (DBD) y fusionando la otra proteína con el dominio activador (AD) del factor de transcripción Gal4. La proteína fusionada con DBD se conoce como cebo, mientras que la proteína fusionada con AD se conoce como presa. En la cepa de levadura, tras la interacción del cebo y la presa, DBD y AD se acercan mucho para generar un factor de transcripción Gal4 funcional cadena arriba del gen informador. El factor de transcripción funcional activa la expresión del gen informador. Además, este método se utiliza actualmente para detectar las interacciones de las proteínas integrales de membrana en células de mamíferos.
¿Cuáles son las similitudes entre el híbrido de levadura uno y el híbrido de levadura dos?
- El híbrido de levadura uno y el híbrido de levadura dos son dos ensayos in vitro para analizar las interacciones ADN-proteína y proteína-proteína.
- Estos ensayos utilizan cepas de levadura.
- Ambos ensayos utilizan el dominio de activación (AD) del factor de transcripción Gal4.
- Utilizan la expresión del gen reportero (HIS3 o LacZ) para detectar interacciones.
- Tienen carnada y presa.
- Ambos ensayos son muy útiles en la investigación biológica moderna.
¿Cuál es la diferencia entre el híbrido de levadura uno y el híbrido de levadura dos?
Yeast one hybrid es un ensayo in vitro para analizar las interacciones entre el ADN y las proteínas, mientras que Yeast two hybrid es un ensayo in vitro para analizar las interacciones entre proteínas y proteínas. Por lo tanto, esta es la diferencia clave entre el híbrido de levadura uno y el híbrido de levadura dos. Además, en un híbrido de levadura, el cebo es un fragmento de ADN y la presa es una molécula de proteína. Por otro lado, en la levadura dos híbridos, tanto el cebo como la presa son moléculas de proteína.
La infografía a continuación enumera las diferencias entre el híbrido de levadura uno y el híbrido de levadura dos en forma tabular para una comparación lado a lado.
Resumen: Híbrido de levadura uno frente a Híbrido de levadura dos
Híbrido de levadura uno y dos híbridos de levadura son dos ensayos importantes basados en in vitro. El híbrido de levadura uno es un ensayo in vitro para analizar las interacciones entre proteínas y ADN, mientras que el híbrido de levadura dos es un ensayo in vitro para analizar las interacciones entre proteínas y proteínas. Por lo tanto, esta es la diferencia clave entre el híbrido de levadura uno y el híbrido de levadura dos.
