La diferencia clave entre la cromatografía de intercambio iónico y la cromatografía de exclusión por tamaño es que la cromatografía de intercambio iónico se usa para analizar sustancias iónicas según la carga, mientras que la cromatografía de exclusión por tamaño se usa para analizar moléculas grandes según el tamaño.
La cromatografía es una técnica analítica que se puede utilizar para analizar diferentes mezclas. Las técnicas cromatográficas se denominan según el parámetro utilizado para analizar las sustancias, p. cromatografía de exclusión por tamaño, cromatografía de intercambio iónico, etc.
¿Qué es la cromatografía de intercambio iónico?
La cromatografía de intercambio iónico es una técnica analítica en la que podemos analizar sustancias iónicas. A menudo es útil analizar aniones y cationes inorgánicos (es decir, aniones de cloruro y nitrato y cationes de potasio y sodio). Aunque no es un método muy común, podemos analizar iones orgánicos usándolo. Además, podemos usar esta técnica para la purificación de proteínas porque las proteínas son moléculas cargadas a ciertos valores de pH. Aquí, usamos una fase estacionaria sólida a la que se pueden unir las partículas cargadas. Por ejemplo, podemos utilizar los copolímeros de resina poliestireno-divinilbenceno como soporte sólido.
Figura 01: Teoría detrás de la cromatografía de intercambio iónico
Para explicar esto con más detalle, la fase estacionaria tiene iones fijos como aniones sulfato o cationes de amina cuaternaria. Cada uno de estos debe asociarse con un contraión (un ión con carga opuesta) si queremos mantener la neutralidad de este sistema. Si el contraión es un catión, llamamos al sistema resina de intercambio catiónico. Pero, si el contraión es un anión, el sistema es una resina de intercambio de aniones. Además, existen cinco pasos principales en la cromatografía de intercambio iónico:
- Etapa inicial
- Adsorción del objetivo
- Inicio de elución
- Fin de elución
- Regeneración
¿Qué es la cromatografía de exclusión por tamaño?
La cromatografía de exclusión por tamaño o SEC es una técnica analítica en la que las moléculas de una mezcla se pueden separar por su tamaño y peso molecular. Por lo general, trabaja con moléculas grandes llamadas macromoléculas. Normalmente, se utiliza una solución acuosa para el análisis. Entonces se llama cromatografía de filtración en gel. Cuando se trata de un disolvente orgánico, se denomina cromatografía de permeación en gel.
La cromatografía de filtración en gel es una forma de cromatografía de exclusión por tamaño en la que utilizamos una solución acuosa como fase móvil. Por lo tanto, la fase móvil que solemos usar en esta técnica es un tampón acuoso. Además, usamos una columna cromatográfica para esta separación y necesitamos llenar la columna con perlas porosas. Usualmente, Sephadex y agarosa son útiles como material poroso. Por lo tanto, estos materiales son la fase estacionaria de nuestro experimento. Además, podemos usar el tamaño de poro de estas perlas para determinar el tamaño de las macromoléculas que estamos separando. Sin embargo, es solo una estimación.
Figura 02: Aparato para cromatografía de exclusión por tamaño
La cromatografía de permeación en gel es una forma de cromatografía de exclusión por tamaño en la que utilizamos un disolvente orgánico como fase móvil. Por lo tanto, podemos usar soluciones como hexano y tolueno para este propósito. La fase estacionaria es un material poroso, al igual que en la cromatografía de filtración en gel. Esta técnica se aplica a menudo a polímeros y otros materiales orgánicos solubles. El método de acción de la técnica es similar al de la cromatografía de filtración en gel.
¿Cuál es la diferencia entre la cromatografía de intercambio iónico y la de exclusión por tamaños?
La cromatografía es una técnica analítica que se puede utilizar para analizar diferentes mezclas. La diferencia clave entre el intercambio iónico y la cromatografía de exclusión por tamaño es que la cromatografía de intercambio iónico se usa para analizar sustancias iónicas según la carga, mientras que la cromatografía de exclusión por tamaño se usa para analizar moléculas grandes según el tamaño.
La siguiente infografía brinda más información sobre la diferencia entre el intercambio iónico y la cromatografía de exclusión por tamaño.
Resumen: intercambio iónico frente a cromatografía de exclusión por tamaño
La cromatografía es una técnica analítica que se puede utilizar para analizar diferentes mezclas. La diferencia clave entre el intercambio iónico y la cromatografía de exclusión por tamaño es que la cromatografía de intercambio iónico se usa para analizar sustancias iónicas según la carga, mientras que la cromatografía de exclusión por tamaño se usa para analizar moléculas grandes según el tamaño.
