La diferencia clave entre la tinción de Coomassie y la tinción de plata es que la tinción de Coomassie es una técnica de tinción de proteínas que utiliza una tinción azul brillante de Coomassie, mientras que la tinción de astilla es una técnica de tinción de proteínas que utiliza una tinción de plata.
La separación e identificación de proteínas son pasos críticos en el análisis del proteoma. Necesitan una caracterización de proteínas de alta resolución después de la electroforesis en gel. Existen numerosas técnicas de tinción que incluyen diferentes tinciones como colorantes aniónicos (azul brillante de coomassie), cationes metálicos (imidazol-zinc), tinción de plata y colorantes fluorescentes, etc. En ocasiones, también se pueden utilizar sondas radiactivas. La elección de la técnica de tinción depende de la sencillez, la disponibilidad de equipos de imagen en el laboratorio, etc.
¿Qué es la tinción de Coomassie?
La tinción de Coomassie es una técnica de tinción de proteínas que utiliza una tinción azul brillante de Coomassie. Por lo general, se denomina técnica del azul de Coomassie. El azul brillante de Coomassie es el tinte proteico aniónico más popular. Esta tinción normalmente tiñe casi todas las proteínas con buena linealidad cuantitativa a sensibilidad media. La tinción azul brillante de Coomassie se une de manera no específica a casi todas las proteínas. Hay dos variantes diferentes de tinción azul brillante de Coomassie: R-250 y G-250. R-250 ofrece tiempos de tinción más cortos, mientras que G-250 está disponible en formulaciones más sensibles y respetuosas con el medio ambiente.
Figura 01: Tinción de Coomassie
Los colorantes Coomassie son muy populares en estudios de espectrometría de masas y estudios de identificación de proteínas. Además, la tinción de coomassie biosegura es una formulación no peligrosa de azul de coomassie G-250 que está actualmente disponible en el mercado. La ventaja de esta formulación es que solo requiere agua para enjuagar y decolorar. La tinción de Coomassie biosegura ofrece una sensibilidad equivalente al azul de Coomassie G-250 convencional, pero mejor que la tinción de Coomassie R-250. Además, tiene un protocolo de tinción más simple y rápido que el azul de Coomassie G-250 convencional. El inconveniente de la tinción con azul de Coomassie es que es menos sensible en comparación con la tinción con plata. La tinción con azul de Coomassie es aproximadamente 50 veces menos sensible que la tinción con plata. Sin embargo, debido a su simplicidad en la unión, se prefiere en muchos estudios.
¿Qué es la tinción de plata?
La tinción de plata es una técnica de tinción de proteínas que utiliza una tinción de plata. La tinción con plata se utiliza para teñir tanto los geles de agarosa como los de poliacrilamida. La tinción con plata de proteínas en geles de agarosa fue desarrollada por primera vez en 1973 por Kerenyi y Gallyas. Posteriormente, se adaptó para proteínas en geles de poliacrilamida que se utilizan en SDS-PAGE. Actualmente, la tinción con plata también se usa para teñir ADN o ARN. Para teñir los geles, los geles se incuban con solución de nitrato de plata en este método. La tinción de plata tiñe los sitios donde las proteínas están presentes de marrón a negro.
Figura 02: Tinción de plata
La intensidad de la tinción con plata depende de la estructura primaria de la proteína. Además, la limpieza de los recipientes utilizados y la pureza de los reactivos también pueden influir en la calidad de la tinción con plata. Sin embargo, el inconveniente de la tinción con plata es que no puede detectar todas las proteínas, especialmente las glicoproteínas y las proteínas con grandes grupos modificados unidos a sus cadenas laterales.
¿Cuáles son las similitudes entre la tinción de Coomassie y la de plata?
- La tinción con Coomassie y la plata son dos técnicas utilizadas en la tinción de proteínas.
- Pueden teñir tanto las proteínas como el ADN.
- Ambas técnicas de tinción tienen inconvenientes.
- Estas técnicas tienen pasos similares, como la fijación, la tinción y la decoloración.
¿Cuál es la diferencia entre la tinción de Coomassie y la de plata?
La tinción de Coomassie es una técnica de tinción de proteínas que utiliza la tinción azul brillante de Coomassie, mientras que la tinción de astilla es una técnica de tinción de proteínas que utiliza la tinción de plata. Por lo tanto, esta es la diferencia clave entre Coomassie y la tinción de plata. Además, la tinción de Coomassie es menos sensible que la tinción de plata.
La siguiente infografía enumera las diferencias entre la tinción de Coomassie y la tinción de plata en forma tabular para una comparación lado a lado.
Resumen: Coomassie frente a tinción de plata
Para visualizar las proteínas, se puede realizar una reacción química de unión de tinte o de producción de color específica de la proteína. Esto se llama tinción de proteínas. Coomassie y la tinción de plata son dos técnicas utilizadas en la tinción de proteínas. La técnica de tinción de Coomassie utiliza la tinción azul brillante de Coomassie, mientras que la tinción de astilla utiliza la tinción de plata. Entonces, esta es la diferencia clave entre Coomassie y la tinción de plata.
