Diferencia clave: citometría de flujo frente a FACS
En el contexto de la teoría celular, las células son la unidad estructural y funcional básica de todos los organismos vivos. La clasificación celular es una metodología que se utiliza para separar diferentes células de acuerdo con las características fisiológicas y morfológicas. Pueden ser de características intracelulares o extracelulares. La interacción del ADN, el ARN y las proteínas se consideran propiedades interactivas intracelulares, mientras que la forma, el tamaño y las diferentes proteínas de superficie se consideran propiedades extracelulares. En la ciencia moderna, las metodologías de clasificación de células han llevado a ayudar a las diferentes investigaciones en estudios biológicos y también en el establecimiento de nuevos principios a través de la investigación en medicina. La clasificación de células se lleva a cabo con varias metodologías que incluyen metodologías primitivas con menos equipo y tecnologías avanzadas con el uso de maquinaria sofisticada. La citometría de flujo, la clasificación de células activadas por fluorescencia (FACS), la selección de células magnéticas y la clasificación de células individuales son las principales metodologías utilizadas. La citometría de flujo y FACS se desarrollan para diferenciar las células según sus propiedades ópticas. FACS es un tipo especializado de citometría de flujo. La citometría de flujo es una metodología que se utiliza durante el análisis de una población heterogénea de células según diferentes moléculas de superficie celular, tamaño y volumen que permite la investigación de células individuales. FACS es un proceso mediante el cual una muestra de mezcla de células se clasifica según sus características de dispersión de luz y fluorescencia en dos o más contenedores. Esta es la diferencia clave entre la citometría de flujo y FACS.
¿Qué es la citometría de flujo?
La citometría de flujo es un método que se utiliza para examinar y determinar la expresión de moléculas intracelulares y la superficie celular y para definir y caracterizar distintos tipos de células. También se utiliza para determinar el volumen celular y el tamaño celular y para evaluar la pureza de las subpoblaciones que se aíslan. Esto permite la evaluación de parámetros múltiples de células individuales aproximadamente al mismo tiempo. La citometría de flujo se utiliza para medir la intensidad de la fluorescencia que se produce debido a los anticuerpos marcados con fluorescencia que ayudan a identificar proteínas o ligandos que se unen a las células asociadas.
Figura 01: Citometría de flujo
Generalmente, la citometría de flujo incluye principalmente tres subsistemas. Son la fluídica, la electrónica y la óptica. En la citometría de flujo, hay cinco componentes principales disponibles que se utilizan en la clasificación de células. Son, una celda de flujo (una corriente de líquido que se utiliza para transportarlos y alinear las celdas para el proceso de detección óptica), un sistema de medición (puede ser de diferentes sistemas, incluyendo, lámparas de mercurio y xenón, refrigeradas por agua de alta potencia o láseres de baja potencia enfriados por aire o láseres de diodo), un ADC; Sistema Convertidor Analógico a Digital, sistema de amplificación y una computadora para análisis. La adquisición es el proceso mediante el cual se recopilan los datos de las muestras utilizando un citómetro de flujo. Este proceso está mediado por una computadora que está conectada con el citómetro de flujo. El software presente en la computadora analiza la información alimentada a la computadora desde el citómetro de flujo. El software también tiene la capacidad de ajustar los parámetros del experimento que controla el citómetro de flujo.
¿Qué es FACS?
En el contexto de la citometría de flujo, la clasificación de células activadas por fluorescencia (FACS) es un método que se utiliza para diferenciar y clasificar una muestra de una mezcla de células biológicas. Las celdas están separadas de dos o más contenedores. El método de clasificación se basa en las características físicas de la célula, que incluyen la dispersión de la luz y las características de fluorescencia de la célula. Esta es una técnica científica importante, que se puede utilizar para obtener resultados cuantitativos y cualitativos fiables de las señales de fluorescencia que se emiten desde cada célula. Durante FACS, inicialmente, la mezcla de células obtenida previamente; una suspensión se dirige al centro de una corriente estrecha de líquido que fluye rápidamente. El flujo de líquido está diseñado para separar las células en la suspensión según el diámetro de cada célula. Se aplica un mecanismo de vibración a la corriente de suspensión que da como resultado la formación de gotas individuales.
Figura 02: FACS
El sistema está calibrado para crear una sola gota con una celda. Justo antes de la formación de gotitas, la suspensión de flujo se mueve a lo largo de un aparato de medición de fluorescencia que detecta la característica de fluorescencia de cada célula. En el punto de formación de gotitas, se coloca un anillo de carga eléctrica en el que se induce una carga al anillo antes de medir la intensidad de la fluorescencia. Una vez que las gotas se forman a partir de la corriente de suspensión, una carga queda atrapada dentro de las gotas que luego ingresa a un sistema de desviación electrostática. Según la carga, el sistema desvía las gotas a diferentes contenedores. El método de aplicación del cargo varía según los diferentes sistemas utilizados en FACS. El equipo utilizado en FACS se conoce como clasificador de células activado por fluorescencia.
¿Cuál es la similitud entre la citometría de flujo y la FACS?
La citometría de flujo y FACS se desarrollan para diferenciar las células según sus propiedades ópticas
¿Cuál es la diferencia entre la citometría de flujo y la FACS?
Citometría de flujo frente a FACS |
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| La citometría de flujo es una metodología que se utiliza durante el análisis de una población heterogénea de células según diferentes moléculas de superficie celular, tamaño y volumen que permite la investigación de células individuales. | FACS es un proceso mediante el cual una mezcla de muestra de células se clasifica según sus características de dispersión de luz y fluorescencia en dos o más contenedores. |
Resumen: citometría de flujo frente a FACS
La célula es la unidad estructural y funcional básica de todos los organismos vivos. La clasificación celular es el proceso mediante el cual las células se aíslan y diferencian en diferentes categorías en función de sus propiedades intracelulares y extracelulares. La citometría de flujo y FACS son dos metodologías importantes en la clasificación de células. Ambos procesos están desarrollados para diferenciar las células según sus propiedades ópticas. La citometría de flujo es una metodología que se utiliza durante el análisis de una población heterogénea de células según diferentes moléculas de superficie celular, tamaño y volumen que permite la investigación de células individuales. FACS es un proceso mediante el cual una muestra de mezcla de células se clasifica según sus características de dispersión de luz y fluorescencia en dos o más contenedores. Esta es la diferencia entre la citometría de flujo y la FACS.
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