Diferencia clave: RNASE A frente a RNASE H
Las ribonucleasas son nucleasas que degradan específicamente el ARN en unidades más pequeñas. Se pueden dividir en dos categorías; endorribonucleasas y exoribonucleasas. La endoribonucleasa es una endonucleasa que puede degradar ARN monocatenario o bicatenario. Rompe los enlaces fosfodiéster dentro de una cadena de polinucleótidos de ARN. Los ejemplos son RNase A, RNase III, RNase T1, RNase P y RNase H. La exoribonucleasa es una exonucleasa que degradó el ARN al eliminar los nucleótidos terminales del extremo 5 o 3 de la molécula de ARN. Los ejemplos son RNase R, RNase II, RNase D y RNase PH.los diferencia clave entre RNASE A y RNASE H es que RNase A es una ribonucleasa pancreática que degrada específicamente el ARN monocatenario en componentes más pequeños, mientras que RNase H es una enzima no específica que escinde el ARN en el híbrido ARN-ADN en unidades más pequeñas a través de el mecanismo hidrolítico.
¿Qué es RNASE A?
La RNasa A es una ribonucleasa pancreática que escinde específicamente los residuos de citosina y uracilo no apareados en el extremo 3' del ARN monocatenario. La RNasa H funciona a una concentración de sal más alta (concentración de NaCl 0,3 M o más alta). La reacción hidrolítica es de dos pasos. Forma un producto fosforilado en 3' a través del intermedio de monofosfato cíclico 2', 3'. Aunque es específico del ARN monocatenario con una concentración de sal más alta, también puede degradar el ARN bicatenario y el ARN en híbridos ARN-ADN con una concentración de NaCl más baja (inferior a NaCl 0,3 M).
Bruce Merrifield sintetizó por primera vez esta enzima. La RNasa A es una enzima muy popular en la investigación molecular. La RNasa A pancreática bovina es un ejemplo de RNasa A. Y es una de las enzimas más resistentes que se utilizan en el laboratorio. Esta enzima no necesita un cofactor para su actividad. Es una enzima altamente termoestable. La RNasa A es la primera enzima y la tercera proteína a la que se le detectó una secuencia de aminoácidos correcta. Esta enzima es muy pequeña con 124 aminoácidos y una masa molecular de 12600da. Y tiene cuatro residuos de histidina (His 12 y His 119 que participan en la reacción catalítica).
Figura 01: La RNasa A
La ARNasa A se puede aislar hirviendo una muestra cruda. Cuando hierve, todas las demás enzimas degradan la RNasa A restante. La RNasa A es una enzima sorprendentemente estable. Esta enzima inhibe con la proteína inhibidora de la ribonucleasa, los metales pesados y los complejos de vanadato de uridina.
¿Qué es la ARNasa H?
La RNasa H es una enzima ribonucleasa inespecífica que puede degradar el ARN en híbridos ARN-ADN a través de una reacción hidrolítica. La RNasa H escinde el enlace 3'-O-P del ARN en un híbrido ARN-ADN. En última instancia, produce productos terminados en fosfato 3'OH y 5'. En la replicación del ADN, juega un papel fundamental al eliminar el cebador de ARN después de que se forman nuevas cadenas de ADN. En condiciones de laboratorio, degrada específicamente el ARN en el híbrido ARN-ADN, pero no el ADN y el ARN no hibridado. Y esta enzima generalmente se usa para destruir la plantilla de ARN después de que se forma la primera cadena de ADN complementaria durante la síntesis de ADNc.
Figura 02: RNasa H
RNasa H también se utiliza en ensayos de protección de nucleasas. También se puede incorporar a la eliminación de la cola poli A del ARNm. La RNasa H tiene la capacidad de destruir el ARN no codificante dentro y fuera de la célula. Los iones metálicos son necesarios como cofactores para esta actividad proteica. Se puede utilizar un quelante (EDTA) para inhibir la enzima RNasa H.
¿Cuáles son las similitudes entre RNASE A y RNASE H?
- Ambas son proteínas por naturaleza.
- Ambas son endorribonucleasas
- Ambos pueden degradar el ARN.
- Ambos realizan reacciones hidrolíticas.
- Los laboratorios moleculares usan ambos.
¿Cuál es la diferencia entre RNASE A y RNASE H?
ARNASA A contra ARNASA H |
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| La RNasa A es una ribonucleasa pancreática que escinde específicamente el extremo 3' de los residuos de citosina y uracilo no apareados del ARN monocatenario a una mayor concentración de sal. | La RNasa H es una enzima ribonucleasa inespecífica que puede degradar el ARN en híbridos ARN-ADN a través de una reacción hidrolítica. |
| Naturaleza de la escisión del ARN | |
| La RNasa A escinde específicamente el ARN monocatenario a una mayor concentración de sal. | La RNasa H escinde el ARN en un híbrido ARN-ADN. |
| Necesidad de cofactores para la actividad | |
| La ARNasa A no necesita cofactores para su actividad. | RNase H necesita iones metálicos como cofactores para su actividad. |
| Inhibidores de la actividad de las proteínas | |
| La proteína inhibidora de la ribonucleasa, los complejos de metales pesados y uridina vanadato inhiben la actividad de la ARNasa A. | Un quelante (EDTA) inhibe la actividad de la RNasa H. |
| Eliminación del cebador de ARN en la replicación del ADN | |
| La ARNasa A no se utiliza para la eliminación de cebadores de ARN en la replicación del ADN. | La RNasa H se utiliza para la eliminación de cebadores de ARN en la replicación del ADN |
| Eliminación de la plantilla de ADN en la síntesis de ADN complementario (ADN-C) | |
| La ARNasa A no se utiliza para la eliminación de la plantilla de ARN durante la síntesis de ADN complementario (ADN-C). | La RNasa H se utiliza para eliminar la plantilla de ARN durante la síntesis de ADN complementario (ADN-C). |
| Eliminación de Poly-A-Tail en ARNm hibridado con Oligo (dt) | |
| La ARNasa A no se usa para eliminar la "cola poli-A" en el ARNm hibridado con oligo (dt). | La ARNasa H se utiliza para eliminar la "cola poli-A" en el ARNm hibridado con oligo (dt) |
Resumen: RNASE A frente a RNASE H
Las ribonucleasas son enzimas nucleasas que tienen la capacidad de dividir el ARN en unidades más pequeñas. Son de dos tipos; endorribonucleasas y exoribonucleasas. La endoribonucleasa es una endonucleasa que tiene la capacidad de degradar ARN monocatenario o bicatenario. Y rompe el enlace fosfodiéster dentro de una cadena de polinucleótidos de ARN. La RNasa A y la RNasa H son dos endorribonucleasas. La RNasa A es una ribonucleasa pancreática que escinde específicamente los residuos de citosina y uracilo no apareados en el extremo 3 'del ARN monocatenario a una concentración de sal más alta. La RNasa H es una enzima ribonucleasa no específica que puede degradar el ARN en un híbrido ARN-ADN mediante una reacción hidrolítica. Esta es la diferencia entre la RNasa A y la RNasa H.
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