Diferencia clave: tinción de Gram frente a cultivo
La tinción de Gram es una técnica de tinción que se realiza para diferenciar las bacterias en dos grupos según el espesor de la capa de peptidoglicano en su pared celular. El cultivo es un método de cultivo y mantenimiento de microorganismos en condiciones de laboratorio para diferentes análisis. La diferencia clave entre la tinción de Gram y el cultivo es su función; cepa Gram una técnica de tinción de bacterias donde el cultivo es un método para cultivar y mantener microorganismos.
¿Qué es la tinción de Gram?
La tinción de Gram es una importante técnica de tinción diferencial utilizada para la identificación bacteriana en microbiología. Esta técnica fue introducida por el bacteriólogo danés Hans Christian Gram en 1884. La tinción de Gram clasifica las bacterias en dos grupos principales: grampositivas y gramnegativas; estos son muy importantes en la clasificación e identificación bacteriana. La tinción de Gram se realiza como paso inicial para la caracterización bacteriana.
Las bacterias se agrupan según las diferencias en su pared celular. Las bacterias Gram positivas contienen una capa gruesa de peptidoglicano en su pared celular, mientras que las bacterias Gram negativas contienen una capa delgada de peptidoglicano en su pared celular, como se muestra en la figura 01. El resultado de la tinción de Gram se basará en la diferencia de grosor en la capa de peptidoglicano de la pared celular.
Figura 1: bacterias Gram positivas y bacterias Gram negativas
La tinción de Grams se realiza utilizando cuatro reactivos diferentes, a saber; colorante primario, mordiente, agente decolorante y colorante de contraste. El cristal violeta y la safranina sirven como tinción principal y de contraste, respectivamente, mientras que los gramos de yodo y el alcohol al 95 % sirven como mordiente y decolorante, respectivamente.
Pasos básicos de la tinción de Gram
- Se prepara un frotis bacteriano en un portaobjetos de vidrio limpio, se fija con calor y se enfría.
- El frotis se inunda con cristal violeta durante 1 o 2 minutos.
- La mancha se enjuaga con agua corriente del grifo lentamente para eliminar el exceso de manchas.
- Se aplican gramos de yodo al frotis durante 1 minuto.
- El frotis se enjuaga con agua del grifo corriendo lentamente
- El frotis se lava con alcohol al 95 % durante 2 a 5 segundos y se enjuaga con agua del grifo a baja velocidad.
- El frotis se contrasta con safranina durante 1 minuto
- El frotis se enjuaga con agua corriente del grifo, se seca y se observa bajo el microscopio.
Al final de la tinción de Gram, las bacterias gram negativas se observarán en color rosa, mientras que las bacterias gram positivas se observarán en color púrpura, como se muestra en la Figura 02. El resultado de la tinción de Gram se decide por el grosor de la capa de peptidoglicano en su pared celular. Durante el paso de decoloración, la tinción primaria y el mordiente se eliminan fácilmente de las bacterias gram negativas y se vuelven incoloros ya que tienen una capa delgada de peptidoglicano. La tinción primaria se retiene en las bacterias Gram positivas ya que tienen una capa gruesa de peptidoglicano. La contratinción no será efectiva para las bacterias Gram positivas debido a la retención de la tinción primaria. Por lo tanto, las bacterias Gram positivas serán visibles en el color de la mancha primaria, es decir, el color púrpura. La contratinción teñirá las bacterias gram negativas y será visible en un color intenso, que es el color de la safranina. Por lo tanto, es fácil clasificar las bacterias en dos grupos mediante la tinción de Gram y es valiosa en la diferenciación e identificación bacteriana.
Figura 2: Cepa Gram
¿Qué es la cultura?
El cultivo microbiano es un método de cultivo y mantenimiento de microorganismos en condiciones de laboratorio para diferentes propósitos. Los cultivos se cultivan en medios sólidos, semisólidos y líquidos según el tipo y el propósito del cultivo de microorganismos. Los cultivos reciben los nutrientes necesarios y las condiciones de crecimiento requeridas por los microorganismos. Hay diferentes componentes de un medio de cultivo, como fuente de energía, fuente de carbono, fuente de nitrógeno, minerales, micronutrientes, agua, agente solidificante, etc. La temperatura, el oxígeno y el pH óptimos deben ajustarse de acuerdo con el tipo de microorganismo cultivado.
Hay diferentes tipos de cultivos microbianos; por ejemplo, cultivo por lotes, cultivo continuo, cultivo por punción, cultivo en placa de agar, cultivo en caldo, etc. Según la composición del medio de cultivo, existen diferentes tipos de medios de cultivo conocidos como medios sintéticos, medios semisintéticos y medios naturales. Los cultivos microbianos se preparan en condiciones estériles dentro de una cámara especial llamada flujo de aire laminar. El medio de cultivo y la cristalería se esterilizan antes de la inoculación del microorganismo deseado. En condiciones estériles adecuadas, el microorganismo objetivo se transfiere al medio nutritivo esterilizado y se incuba a temperatura óptima. Dentro del medio, los microorganismos crecerán y se multiplicarán utilizando los nutrientes provistos.
Figura 3: Un cultivo bacteriano en placa
¿Cuál es la diferencia entre tinción de Gram y cultivo?
Tinción de Gram frente a cultivo |
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| La cepa Grams es una técnica de tinción diferencial utilizada para la diferenciación e identificación bacteriana. | El cultivo microbiano es un método de cultivo de microorganismos en el laboratorio. |
| Componentes | |
| Esto usa diferentes reactivos incluyendo dos colorantes. | Esto utiliza diferentes medios de cultivo, como medios sólidos, semisólidos y líquidos compuestos de nutrientes y otras condiciones necesarias. |
| Funciones básicas | |
| Esto permite agrupar las bacterias en dos grupos: gramos negativos y gramos positivos. | Esto permite la multiplicación de microorganismos para diferentes propósitos. |
| Base | |
| El resultado de la tinción de Gram se basa en las diferencias en la capa de peptidoglicano de la pared celular. | Los microorganismos crecerán y se multiplicarán dentro de los medios de cultivo. |
| Resultado | |
| Las bacterias Gram negativas son visibles en color rosa y las bacterias Gram positivas son visibles en color púrpura. | En las placas se pueden ver colonias de microorganismos. En medios líquidos, los microorganismos se encuentran en forma suspendida. |
Resumen: tinción de Gram frente a cultivo
Los cultivos microbianos se preparan y mantienen en condiciones de laboratorio para diferentes propósitos, como almacenamiento, pruebas, purificación química, etc. La tinción de Gram es un procedimiento de tinción que diferencia las bacterias en dos grupos principales llamados bacterias Gram negativas y bacterias Gram positivas. Por lo tanto, la diferencia entre la tinción de Gram y el cultivo es que la tinción de Gram es una técnica de tinción de bacterias, mientras que el cultivo es un método para cultivar y mantener microorganismos en los laboratorios.
