Diferencia clave: YAC frente a M13 Phage Vector
La clonación de ADN es un proceso importante que permite la propagación de importantes fragmentos de ADN de organismos. Requiere la unión de ADN específico con ADN vector para crear ADN recombinante que se transforma en el organismo huésped. Un vector es una molécula de ADN que se comporta como un vehículo para transportar material genético extraño a otra célula u organismo. Debe ser capaz de replicarse dentro del organismo huésped y producir múltiples copias de ADN recombinante. Hay diferentes tipos de vectores utilizados en la clonación de ADN. El cromosoma artificial de levadura (YAC) y el vector fago M13 son dos tipos entre ellos. La diferencia clave entre el vector del fago YAC y M13 es que YAC es un cromosoma artificial que se replica en las células de levadura, mientras que el vector del fago M13 es un ADN circular monocatenario del bacteriófago M13 que se replica en las células de E Coli.
¿Qué es un vector YAC?
YAC es un cromosoma construido artificialmente que tiene la capacidad de transportar un gran segmento de ADN extraño y replicarse dentro de las células de levadura. Tiene secuencias de centrómero, telómero y replicación autónoma esenciales para la replicación y la estabilidad. YAC también debe tener un marcador o marcadores selectivos y sitios de restricción para convertirlo en un vector de clonación eficaz. Se pueden insertar secuencias grandes que van desde 1000 kb a 2000 kb en YAC y transferirse a la levadura.
Figura 01: Vector YAC
¿Qué es el vector fago M13?
El bacteriófago M13 es un virus que infecta y se replica en E Coli. El genoma del bacteriófago M13 es de tamaño pequeño, alrededor de 6,7 kb. Es un ADN monocatenario, circular y de sentido positivo. Este virus infecta específicamente a la bacteria E Coli a través de F pilus. Una vez que ingresa el ssDNA en la bacteria, sintetiza su hebra complementaria y se convierte en dsDNA o la forma replicativa (RF) de M13. RF puede comportarse como un plásmido dentro del organismo huésped. El dsDNA se replica dentro de E Coli y produce ssDNA con nuevos fagos. Estos nuevos fagos se liberan continuamente de E Coli sin matar a la célula huésped. Sin embargo, la infección ralentiza el crecimiento de E Coli. El dsDNA se puede extraer de células bacterianas y usarse como vectores en la clonación de ADN. Se conocen como vectores del fago M13. Se pueden manipular y usar fácilmente de manera similar a los vectores de plásmidos.
La capacidad inherente de infección de estos fagos M13 sirve como una buena cualificación para su uso como vector en la clonación de genes. Al desarrollar M13 en un vector, se deben incorporar varios elementos a su genoma. Son, un gen para la proteína represora lac (lac I), la región próxima al operador del gen lac Z, un promotor lac y un sitio de clonación múltiple (polienlazador). Cuando se usa dsDNA de M13 como vectores, se puede tratar como un vector plásmido. Sin embargo, el uso de ssDNA M13 tiene ventajas en la secuenciación de ADN y la mutagénesis dirigida al sitio.
Dado que el vector del fago M13 tiene varios sitios de clonación en la región lacZ, los vectores recombinados se pueden identificar fácilmente mediante la detección de colonias azul/blanca en placas de agar que contienen IPTG y X-Gal. Las placas azules producidas en las placas no contienen los fagos recombinados. Por lo tanto, los fagos con insertos se pueden seleccionar con fines de clonación.
Figura 02: Bacteriófago M13
¿Cuál es la diferencia entre YAC y M13 Phage Vector?
YAC frente a vector fago M13 |
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| YAC es un cromosoma diseñado genéticamente que tiene la capacidad de transportar un gran segmento de ADN extraño y replicarse dentro de las células de levadura. | El vector del fago M13 es un vector viral desarrollado por el bacteriófago M13 que se utiliza para insertar ADN extraño en E Coli. |
| Propósito | |
| Los YAC se diseñaron para clonar grandes fragmentos de ADN genómico en levadura. | Los vectores del fago M13 se utilizan para insertar ADN extraño en E Coli. |
| Insertar longitud | |
| Los YAC pueden contener inserciones genómicas del tamaño de una megabase (1000 kb – 2000 kb). | El tamaño de las inserciones es de aproximadamente 1500 bps. |
| Construcción | |
| El ADN YAC es difícil de purificar intacto y requiere una alta concentración para generar el sistema vector YAC. | Ocurre a través de una cadena de electrones fotosintéticos cíclicos. |
| Estabilidad | |
| YAC es inestable. | Los fagos M13 se pueden extraer fácilmente. |
| Tamaño | |
| Las enzimas son moléculas más grandes. | Los fagos M13 son estables que los YAC. |
Resumen: YAC vs M13 Phage Vector
YAC es un sistema de vector construido artificialmente que utiliza una región específica del cromosoma de levadura para insertar grandes segmentos de material genético en las células de levadura. El vector del fago M13 es un sistema de vector derivado del bacteriófago M 13 que utiliza E coli como organismo huésped. Esta es la principal diferencia entre YAC y M13 Phage Vector. Ambos son igualmente útiles en la tecnología del ADN recombinante y la clonación de genes.
