Diferencia clave: Taq polimerasa frente a ADN polimerasa
La ADN polimerasa es una enzima que crea nuevo ADN a partir de sus componentes básicos (nucleótidos). En procariotas y eucariotas se encuentran diferentes tipos de ADN polimerasas. La duplicación del ADN es factible debido a la presencia de estas enzimas especiales, y la información genética se transmite a la descendencia por la acción de las ADN polimerasas. Taq polimerasa es un tipo especial de polimerasa de ADN que es termoestable y se usa ampliamente en PCR. La polimerasa Taq se encuentra en bacterias termófilas y se purifica en la replicación de ADN in vitro. La diferencia clave entre la Taq polimerasa y la ADN polimerasa es que la Taq polimerasa puede soportar altas temperaturas sin desnaturalizarse, mientras que otras ADN polimerasas se desnaturalizan a altas temperaturas (a temperaturas de degradación de proteínas).
¿Qué es la polimerasa Taq?
La polimerasa Taq (ADN polimerasa Taq) es una enzima utilizada para sintetizar ADN in vitro mediante la técnica de PCR. Es producido por la bacteria termófila llamada Thermus aquaticus que vive en aguas termales y respiraderos termales. Taq polimerasa es una enzima termoestable que no se degrada a altas temperaturas. La polimerasa Taq se purificó por primera vez y se publicó en Chien et al. en 1976. La técnica de PCR se realiza con la ayuda de la polimerasa Taq debido a su capacidad para tolerar altas temperaturas y fluctuaciones de temperatura durante la PCR. La polimerasa Taq cataliza la síntesis de ADN cuando hay cebadores, nucleótidos y el ADN molde monocatenario. La enzima consta de un solo polipéptido con un peso molecular de aproximadamente 94 kDa. La polimerasa Taq muestra su actividad óptima a 80 °C y en un rango de pH de 7 a 8 con la presencia de iones de magnesio. Tiene actividad polimerasa y exonucleasa. La enzima está compuesta por una sola cadena polipeptídica y el gen de la polimerasa Taq contiene un alto contenido de G y C (67.9%).
La polimerasa Taq termoestable permite realizar PCR a altas temperaturas, lo que aumenta la especificidad de los cebadores y reduce la producción de productos de PCR no deseados (dímeros de cebadores). La polimerasa Taq también elimina la necesidad de agregar nuevas enzimas a la reacción de PCR después de cada ciclo de reacción de PCR debido a su capacidad para soportar altas temperaturas. El descubrimiento de la polimerasa Taq permitió que la PCR se realizara en un solo tubo cerrado en una máquina relativamente simple. Debido a estas propiedades de la polimerasa Taq, la PCR se convierte en una popular técnica de laboratorio rutinaria en muchos análisis de biología molecular relacionados con el análisis de ADN.
La polimerasa Taq se usa ampliamente en técnicas de biología molecular, y existe la necesidad de producir polimerasa Taq a gran escala. Por lo tanto, utilizando la tecnología de ADN recombinante y la clonación de genes, el gen que codifica la polimerasa de ADN Taq se ha clonado y expresado en Escherichia coli. Esto ha facilitado enormemente la producción de polimerasa Taq recombinante y ha reducido el precio de esta enzima para un uso adecuado.
Figura 1: Taq polimerasa
¿Qué es la ADN polimerasa?
La ADN polimerasa es una enzima que cataliza la síntesis de ADN a partir de nucleótidos. Es la enzima más precisa responsable de duplicar genomas y pasar información genética a la descendencia. Durante la división celular, la ADN polimerasa duplica todo su ADN y pasa una copia a cada célula hija. En 1955, Arthur Kornberg descubrió la ADN polimerasa en E Coli. La función de la ADN polimerasa depende de varios requisitos; plantilla de ADN, iones Mg+2, los cuatro tipos de desoxinucleótidos (dATP, dTTP, dCTP y d GTP) y una secuencia corta de ARN (cebador). La síntesis del ADN se realiza en la dirección de 5' a 3' por la ADN polimerasa.
Las ADN polimerasas se pueden agrupar en siete familias diferentes: A, B, C, D, X, Y y RT (transcriptasa inversa). Los retrovirus codifican para RT; una polimerasa de ADN inusual que necesita una plantilla de ARN para la síntesis de ADN. Hay cinco tipos diferentes de ADN polimerasas que se encuentran en los procariotas para diferentes funciones en la replicación del ADN. La ADN polimerasa 3 es responsable de la polimerización de la nueva cadena de ADN. La ADN polimerasa 1 es responsable de reparar y parchear el ADN. Las ADN polimerasas 2, 4 y 5 son responsables de reparar y corregir el ADN. En los eucariotas, hay 15 tipos distintos de polimerasas de ADN. Incluyen cinco familias principales.
Figura 2: ADN polimerasa
Las polimerasas de ADN se utilizan en la clonación de genes, PCR, secuenciación de ADN, detección de SNP, diagnóstico molecular, etc. La polimerasa Taq es un tipo de polimerasa de ADN que puede tolerar altas temperaturas y estar disponible para la síntesis de ADN sin degradación.
¿Cuál es la diferencia entre Taq polimerasa y ADN polimerasa?
Taq polimerasa frente a ADN polimerasa |
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| La ADN polimerasa Taq es una enzima que crea ADN. Es una enzima termoestable que se encuentra en los termófilos | La ADN polimerasa es una enzima que facilita la replicación del ADN y se encuentra tanto en organismos procarióticos como eucarióticos. |
| Degradación a altas temperaturas | |
| La polimerasa Taq es activa a altas temperaturas. | Las polimerasas de ADN se degradan a altas temperaturas que desnaturalizan las proteínas. |
| Usar | |
| Esto es ampliamente utilizado en PCR | La polimerasa Taq reemplazó a la ADN polimerasa de coli utilizada originalmente en PCR. |
Resumen: Taq polimerasa frente a ADN polimerasa
Las polimerasas de ADN son las enzimas que sintetizan ADN a partir de desoxinucleótidos (bloques de construcción de ADN) cuando la plantilla y los cebadores están disponibles. Se requieren polimerasas de ADN para duplicar el ADN de las células y pasar a células hijas idénticas durante la división celular. Las ADN polimerasas agregan nuevos nucleótidos al extremo 3' del cebador y alargan la síntesis de la nueva cadena de ADN en la dirección 5' a 3'. La ADN polimerasa Taq es una de las enzimas ADN polimerasa que es muy útil en el método de amplificación de ADN de la reacción en cadena de la polimerasa (PCR). La ADN polimerasa 1 de E. coli se usó antes para la PCR, pero la Taq polimerasa comercial la reemplazó debido a su alta especificidad de unión del cebador a temperaturas elevadas y la producción de un mayor rendimiento del producto deseado con menos productos de amplificación no específicos. Esta es la diferencia entre la polimerasa Taq y la polimerasa de ADN.
