La diferencia clave entre BL21 y DH5 Alpha es que BL21 es una célula de E. coli competente diseñada genéticamente deficiente en proteasa que se usa principalmente para la expresión de proteínas, mientras que DH5 Alpha es una célula de E. coli competente diseñada genéticamente con mutación recA1 que se usa principalmente para la transformación de plásmidos.
E. coli es uno de los famosos organismos de elección para la producción de proteínas recombinantes. Se ha convertido en la plataforma de expresión más popular a lo largo de los años. También se utiliza como fábrica de células. BL21 y DH5 Alpha son dos células de E. coli modificadas genéticamente que se utilizan actualmente para la expresión de proteínas y la transformación de plásmidos, respectivamente.
¿Qué es BL21?
BL21 es una célula de E.coli modificada genéticamente competente y deficiente en proteasa que se utiliza principalmente para la expresión de proteínas. E. coli BL21 es una célula bacteriana derivada de la cepa B. Tiene defectos de la proteasa Lon y de la proteasa de membrana externa ompT. Se usa comúnmente para la expresión de proteínas recombinantes porque normalmente brinda estabilidad a las proteínas expresadas. BL21 es útil para la expresión de proteínas con pCold I-IV DNA y pCold TF DNA. Pero esta célula competente de E. coli no está destinada a un sistema de expresión de proteínas que utilice el promotor T7 como el sistema pET. La razón detrás de esto es que BL21 no expresa la polimerasa de ARN T7. Además, no se recomienda su uso para la construcción o preparación de plásmidos ya que no tiene mutación recA.
Figura 01: BL21
BL21 fue descrito por primera vez por Studier en 1986 después de varias modificaciones de la línea B. Las células BL21 son deficientes en la proteasa LON, que degrada muchas proteínas extrañas. Además, f alta otro gen que codifica para la proteasa de membrana externa (OmpT) cuya función es degradar proteínas extracelulares. La f alta de estas proteínas desencadena la producción exitosa de proteína extraña en las células E. coli BL21. Además, la mutación hsdSB en estas células evita la metilación del ADN extraño y la alteración en las células BL21.
¿Qué es DH5 alfa?
DH5 Alpha es una célula competente de E. coli diseñada genéticamente con mutación recA1 que se utiliza principalmente para la transformación de plásmidos. Las células DH5 Alpha E. coli están diseñadas genéticamente por el biólogo estadounidense Douglas Hanahan para maximizar la eficiencia de la transformación. La célula DH5 alfa tiene tres mutaciones distintas: recA1, endA1 y lacZΔM15. recA1 es una mutación de punto único que reemplaza la glicina 160 con un residuo de ácido aspártico en el polipéptido recA. Esta mutación inhabilita la actividad de las recombinasas e inactiva la recombinación homóloga. La mutación endA1 inactiva una endonucleasa intracelular que evita que degrade el plásmido insertado.
Figura 02: DH5 Alpha
Además, la mutación lacZΔM15 permite la detección azul-blanca de las células transformadas. Estas células son células competentes. A menudo se utilizan con la transformación de cloruro de calcio para insertar el plásmido deseado. Una investigación reciente identificó que la célula DH5 Alfa con el método de Hanahan era la célula competente más eficiente para la transformación de plásmidos.
¿Cuáles son las similitudes entre BL21 y DH5 Alpha?
- BL21 y DH5 Alpha son dos E.coli modificadas genéticamente
- Ambas son células competentes.
- Son distintas mutaciones.
- Ninguno tiene un hábitat natural.
- Estos se utilizan con fines de laboratorio, como estudios de expresión y procedimientos de clonación.
¿Cuál es la diferencia entre BL21 y DH5 Alpha?
BL21 es una célula de E. coli competente modificada genéticamente deficiente en proteasa que se utiliza principalmente para la expresión de proteínas. Por otro lado, DH5 Alpha es una célula de E. coli competente diseñada genéticamente con mutación recA1 que se utiliza principalmente para la transformación de plásmidos. Entonces, esta es la diferencia clave entre BL21 y DH5 Alpha. Además, la célula BL21 E. coli no tiene mutación recA1, mientras que la célula DH5 Alpha E. coli sí tiene mutación recA1.
La siguiente infografía enumera las diferencias entre BL21 y DH5 Alpha en forma tabular.
Resumen: BL21 frente a DH5 Alpha
Las cepas no patógenas de E. coli son desarrolladas genéticamente por científicos para estudios de expresión en laboratorio y fines de clonación. BL21 y DH5 Alpha son dos células de E. coli modificadas genéticamente. BL21 se utiliza principalmente para estudios de expresión de proteínas. Por otro lado, DH5 Alpha se usa principalmente para fines de transformación de plásmidos. Por lo tanto, este es el resumen de la diferencia entre BL21 y DH5 Alpha.
