La diferencia clave entre ELISA competitivo y no competitivo es que el ELISA competitivo usa un antígeno de inhibición mientras que el ELISA no competitivo no usa un antígeno de inhibición para el ensayo.
El ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) es un ensayo inmunológico que detecta varios objetivos, como anticuerpos, antígenos, proteínas y glicoproteínas. Es un método rápido y sencillo de realizar. Por lo tanto, se utiliza más a menudo con fines de investigación y diagnóstico. ELISA implica el uso de enzimas y la unión específica de anticuerpos y antígenos. Según cómo ocurren las reacciones, hay cuatro tipos de ELISA: ELISA directo, ELISA indirecto, ELISA tipo sándwich y ELISA de inhibición. El ELISA directo, indirecto y tipo sándwich son tipos de ELISA no competitivos, mientras que el ELISA de inhibición es un tipo de ELISA complementario. El objetivo principal de este artículo es discutir la diferencia entre ELISA competitivo y no competitivo.
¿Qué es ELISA competitivo?
El ELISA competitivo mide la concentración de antígeno en una muestra a través de la detección de interferencia de señal. Aquí, el ensayo utiliza un antígeno inhibidor. Por lo tanto, es un tipo de ELISA de inhibición. Durante este procedimiento, los antígenos presentes en la muestra compiten con el antígeno de referencia seleccionado para unirse a una cantidad específica de anticuerpo marcado. Además, este procedimiento se inicia con la incubación de la muestra, con el exceso de anticuerpo marcado. Además, el antígeno de referencia debe recubrirse previamente en una placa de ensayo de pocillos múltiples. Luego, la mezcla de muestra debe agregarse a la placa de ensayo que contiene el antígeno de referencia. Los anticuerpos libres se unirán al antígeno de referencia dependiendo de la cantidad de antígeno en la muestra. Por lo tanto, si hay más antígeno de muestra presente, se detectará menos antígeno de referencia. Por lo tanto, crea una señal más débil.
Figura 01: ELISA
Por el contrario, cuando la muestra contiene menos cantidad de antígeno, más y más antígeno de referencia ocupará los anticuerpos y dará una señal fuerte. Dado que el ELISA competitivo da una señal más fuerte cuando la muestra contiene una cantidad baja de antígenos, el ELISA competitivo es un ensayo muy sensible, incluso para muestras con una cantidad pequeña de antígenos.
En algunos kits ELISA competitivos, se utiliza un antígeno marcado en lugar de un anticuerpo marcado. Aquí, el antígeno marcado y el antígeno de muestra competirán por unirse al anticuerpo primario. De manera similar, cuando la cantidad de antígeno en la muestra es baja, la cantidad de antígeno marcado que se une a los anticuerpos será mayor y creará una señal más fuerte.
¿Qué es ELISA no competitivo?
Entre los cuatro tipos de ELISA, tres tipos son ELISA no competitivos. Son ELISA directo, ELISA indirecto y ELISA sándwich. Los tres formatos funcionan bajo el principio común de ELISA con ligeras diferencias en sus metodologías.
El ELISA directo utiliza un anticuerpo primario marcado con una enzima. Por lo tanto, no requiere un anticuerpo secundario. Por lo tanto, ELISA directo es más rápido que otros tipos de ELISA. El anticuerpo primario se unirá directamente al antígeno objetivo inmovilizado que está presente en la placa. Por lo tanto, tendrá lugar la reacción enzima-sustrato, produciendo una señal visible.
Figura 02: ELISA sándwich
A diferencia del ELISA directo, el ELISA indirecto utiliza un anticuerpo primario no marcado y un anticuerpo secundario marcado con una enzima. Una vez que el anticuerpo primario se une al antígeno inmovilizado, el anticuerpo secundario se une al anticuerpo primario. La enzima del anticuerpo secundario reaccionará con el antígeno y producirá una señal visible. Sandwich ELISA es diferente tanto a ELISA directo como indirecto. Aquí, el anticuerpo se inmoviliza en la pared de la placa de ensayo.
¿Cuáles son las similitudes entre ELISA competitivo y no competitivo?
- El ELISA competitivo y no competitivo son dos tipos de técnicas de ensayo inmunoabsorbente.
- Son técnicas muy flexibles y sensibles.
- Además, tanto el ELISA competitivo como el no competitivo son inmunoensayos ligados a enzimas.
- Además, ambos métodos generan una señal debido a una reacción enzima-sustrato.
¿Cuál es la diferencia entre ELISA competitivo y no competitivo?
El ELISA competitivo es un tipo de ELISA que se basa en la finalización entre el antígeno analito y el antígeno marcado para una cantidad limitada de anticuerpo específico. Por otro lado, no existe tal competencia entre el antígeno de interés y el antígeno de referencia en ELISA no competitivo. Por lo tanto, esta es la diferencia clave entre ELISA competitivo y no competitivo. De manera similar, ELISA competitivo es un ELISA de inhibición, mientras que ELISA no competitivo no es un ELISA de inhibición. Entonces, esta también es una diferencia entre ELISA competitivo y no competitivo.
Además, ELISA competitivo es más adecuado para medir una cantidad baja de antígeno de interés. Es un método sensible. Por otro lado, ELISA no competitivo no depende de la cantidad de antígenos presentes en una muestra. Por lo tanto, esta también es una diferencia entre ELISA competitivo y no competitivo.
La siguiente infografía explica comparativamente la diferencia entre ELISA competitivo y no competitivo.
Resumen: ELISA competitivo frente a no competitivo
ELISA competitivo y no competitivo son los dos tipos principales de ELISA o ensayos inmunoabsorbentes ligados a enzimas. Al resumir la diferencia entre ELISA competitivo y no competitivo, el ELISA competitivo se basa en la competencia entre el antígeno de interés y el antígeno de referencia hacia la cantidad limitada de anticuerpos. Por lo tanto, ELISA competitivo también se denomina ELISA de inhibición. Por otro lado, ELISA no competitivo no se basa en la competencia entre los antígenos diana y los antígenos de referencia. Utiliza un exceso de anticuerpo específico marcado contra el analito de interés. Por lo tanto, esta es la diferencia clave entre ELISA competitivo y no competitivo. ELISA directo, ELISA indirecto y ELISA sándwich son los tres tipos principales de ELISA no competitivo.
