La diferencia clave entre GFP y EGFP es que GFP es una proteína de tipo salvaje incorporada en la clonación molecular de células que no son de mamíferos, mientras que EGFP es un tipo de GFP mejorado o modificado que puede usarse en células de mamíferos.
La clonación molecular es una técnica avanzada que los científicos usan inmensamente para expresar proteínas mediante tecnología recombinante. En la tecnología del ADN recombinante, es necesario transformar con éxito el vector recombinante en un organismo huésped. Por lo tanto, durante el proceso de transformación, debe identificarse y confirmarse si el gen de interés se ha transformado o no en el huésped. Para evaluar esto, los biólogos moleculares adoptan varias técnicas. De esas técnicas, una es el gen informador. Estos genes informadores actúan como marcadores seleccionables para seleccionar los transformantes correctos. Por lo tanto, la proteína fluorescente verde (GFP) y la proteína fluorescente verde mejorada (EGFP) son dos proteínas indicadoras utilizadas en la clonación molecular.
¿Qué es GFP?
GFP es una proteína de tipo salvaje que contiene 238 residuos de aminoácidos y varias regiones seleccionables de secuencias de aminoácidos que la distinguen de las otras proteínas fluorescentes. Además, esta proteína de tipo salvaje estaba originalmente aislada de Aequorea Victoria; un tipo de medusa. Sin embargo, en fenómenos naturales, la medusa era capaz de producir fluorescencia de color verde en respuesta a ciertos estímulos.
Anteriormente, este concepto sorprendió a los científicos y decidieron utilizarlo en sus tecnologías de ADN recombinante. En consecuencia, los científicos utilizaron esta forma mutante del gen de tipo salvaje como gen informador en sus estudios de expresión génica. El gen de tipo salvaje de GFP es capaz de producir una proteína que produce fluorescencia a temperatura ambiente o bajo luz ultravioleta. Por tanto, cuando se inserta en los transformantes, expresa y produce fluorescencia. Si la fluorescencia resulta después del proceso de transformación, confirma el éxito del proceso de transformación. En palabras simples, la emisión de fluorescencia señala la transformación exitosa del vector que transporta el gen de interés en el huésped.
Figura 01: GFP
Por esta razón, la GFP actúa como un marcador in vivo de la expresión génica. En la actualidad, se utilizan técnicas de ingeniería genética para producir GFP. Además, muchas versiones mejoradas de GFP, como EGFP, están disponibles. Por lo tanto, esto permite el uso eficiente de la GFP en la clonación molecular y estudios de expresión génica.
¿Qué es EGFP?
La proteína fluorescente verde mejorada o EGFP es una versión mejorada de GFP. En palabras simples, podemos definir EGFP como una versión diseñada de GFP de tipo salvaje. Cuando el gen de tipo salvaje de GFP muta, produce efectos beneficiosos. Por lo tanto, el gen mutado de GFP permite la expresión de nuevos caracteres y, como resultado, podemos producir Enhanced GFP con características mejoradas. Además, podemos introducir mutaciones con éxito en el gen GFP de tipo salvaje usando irradiación o métodos químicos. Estos genes mutados luego producen el EGFP, que tiene características más beneficiosas.
Figura 02: EGFP
Las características mejoradas de EGFP son las siguientes:
- Capaz de emitir señales de fluorescencia más potentes.
- Tiene alta sensibilidad.
- Se puede usar en células de mamíferos en lugar de procariotas y otros eucariotas de nivel inferior.
- Además, aumenta la pureza del producto.
Por lo tanto, en comparación con GFP, EGFP es la opción preferida para los estudios de expresión génica. Sin embargo, el producto es más caro en comparación con GFP.
¿Cuáles son las similitudes entre GFP y EGFP?
- GFP y EGFP son dos proteínas que tienen la capacidad de emitir color verde
- Por lo tanto, ambas funcionan como proteínas indicadoras en los estudios de expresión génica.
- Además, es posible sintetizar ambos usando tecnología de ADN recombinante.
- Además, es fácil mutar aún más estos dos tipos para sintetizar formas mejoradas.
¿Cuál es la diferencia entre GFP y EGFP?
El gen informador es un gen que se une al gen de interés en la tecnología del ADN recombinante. Señala la transformación exitosa del vector recombinante al huésped. Aquí, GFP y EGFP son dos tipos de proteínas fluorescentes verdes que funcionan como proteínas indicadoras. Sin embargo, la diferencia clave entre GFP y EGFP es que GFP es de tipo salvaje, mientras que EGFP es una versión diseñada de GFP. Además, EGFP tiene características más beneficiosas que GFP. Por ejemplo, EGFP produce una luz fluorescente más intensa y es más sensible que GFP. Otra diferencia entre GFP y EGFP son los sistemas en los que podemos utilizar estos. Los sistemas de no mamíferos usan GFP mientras que los sistemas de mamíferos usan EGFP.
La siguiente infografía presenta la diferencia entre GFP y EGFP en forma tabular.
Resumen: GFP frente a EGFP
GFP y EGFP son proteínas indicadoras en estudios de clonación molecular y expresión génica. GFP es la proteína de tipo salvaje, que es una proteína verde fluorescente. La proteína estaba inicialmente aislada de la medusa Aequorea victoria. Por el contrario, EFGP es una forma mejorada de proteína GFP. Es un mutante del tipo salvaje con características mejoradas. Por lo tanto, EFGP tiene una mayor intensidad de señal y una mayor sensibilidad. Por lo tanto, podemos usarlo en vectores de mamíferos. Por el contrario, el uso de GFP es principalmente solo en vectores no mamíferos. En general, esta es la diferencia entre GFP y EGFP.
