La diferencia clave entre el ensayo de micronúcleo y cometa es que el ensayo de micronúcleo es importante para verificar el daño cromosómico como consecuencia de la exposición a mutágenos, mientras que el ensayo de cometa es importante para detectar daño primario en el ADN de células individuales.
Los ensayos de genotoxicidad ayudan a evaluar las posibilidades de mutaciones y anomalías cromosómicas. Las genotoxinas incluyen sustancias químicas y radiación. Carcinógenos, mutágenos y teratógenos son las principales categorías de genotoxinas. Causan diversos daños, como mutaciones puntuales, deleciones, roturas de cadena simple y doble, aberraciones cromosómicas, formaciones de micronúcleos, reparación de ADN e interacciones del ciclo celular. Tales condiciones pueden conducir a una amplia variedad de enfermedades y los ensayos de genotoxicidad previenen el daño potencial de estas condiciones. El ensayo de micronúcleo y el ensayo de cometa son dos técnicas bajo los ensayos de genotoxicidad.
¿Qué es el ensayo de micronúcleos?
El ensayo de micronúcleos es un ensayo para evaluar el daño cromosómico como consecuencia de la exposición a mutágenos. Es importante en el cribado de productos químicos que provocan la formación de husos y micronúcleos. Un ensayo de micronúcleos proporciona información sobre la estabilidad de los productos químicos cuando interfieren con la estructura y función de los cromosomas. Muchos carcinógenos dan positivo en ensayos de micronúcleos. El proceso de ensayo implica un tratamiento químico y la medición de la frecuencia de células micronucleadas. Si hay un aumento anormal en el número de células de micronúcleos, se concluye que la sustancia química induce daño cromosómico.
Un ensayo de micronúcleo generalmente se lleva a cabo en células que se dividen activamente. Por lo tanto, los eritrocitos y las células madre de la médula ósea producidos a través de divisiones celulares son candidatos ideales para tales ensayos. Experimentan una rotación constante y rápida. Dado que los eritrocitos no tienen núcleos verdaderos, hace que las células micronucleadas sean más visibles al final del ensayo.
Figura 01: Observación del ensayo de micronúcleos
Los ensayos de micronúcleos son económicos, más rápidos, convenientes y requieren menos habilidades para llevarlos a cabo. Reflejan las aberraciones cromosómicas rápidamente de manera confiable y son extremadamente útiles para evaluar rápidamente los daños cromosómicos. Un tipo especial y versátil de ensayo de micronúcleo es el ensayo de citoma de micronúcleo en bloque de citocinesis (CBMNcyt). Es el ensayo preferible para medir el daño cromosómico y la inestabilidad en las células. Sin embargo, el principal problema de usar el ensayo de micronúcleos es que no puede determinar diferentes tipos de aberraciones cromosómicas, y el ensayo influye en la tasa mitótica y la proporción de muerte celular, lo que hace que los resultados cambien.
¿Qué es el ensayo del cometa?
El ensayo Comet, que también se conoce como ensayo de electroforesis en gel único, es una técnica sencilla y sensible para detectar daños en el ADN. Mide las rupturas del ADN en las células eucariotas y es una técnica estándar para el control biológico y las pruebas de genotoxicidad.
El ensayo Comet participa en la encapsulación de células en suspensiones de agarosa de bajo punto de fusión, la lisis de células en condiciones neutras o alcalinas y la electroforesis de células lisadas suspendidas. Durante el proceso de encapsulación, las células se suspenden en agarosa fundida de bajo punto de fusión, y la agarosa forma una matriz de fibras de carbohidratos para anclarlas en su lugar. La agarosa es osmóticamente neutra; por lo tanto, permite que las soluciones penetren a través del gel y afecten las células sin perturbarlas ni desplazarlas. La solución de lisis es una solución salina acuosa altamente concentrada y un detergente. Esta sal interrumpe las proteínas y los patrones de unión dentro de la célula mientras interrumpe el contenido de ARN de la célula. Las células se destruyen y todas las proteínas, el ARN y los constituyentes citoplasmáticos y nucleoplásmicos se rompen y se difunden en la matriz de agarosa, dejando el ADN.
Figura 02: Ensayo de cometa
La solución de electroforesis es una solución alcalina en la que la doble hélice del ADN se desnaturaliza y el nucleoide se vuelve monocatenario. Durante este proceso, se aplica un campo eléctrico para analizar las imágenes. El análisis de imagen mide la intensidad general de la fluorescencia para el ADN y el nucleoide y compara los dos. La estructura general se asemeja a un cometa con una cabeza circular que corresponde al ADN restante no dañado y una cola para el ADN dañado. Cuanto más brillante y más larga sea la cola debido a señales más fuertes, mayor será el nivel de daño.
¿Cuáles son las similitudes entre el ensayo de micronúcleo y cometa?
- Micronucleus y el ensayo del cometa son económicos, más rápidos, convenientes y requieren menos habilidades.
- Se realizan principalmente en el ADN.
- Ambos ensayos ayudan a evaluar mutaciones y anomalías cromosómicas.
- Además, ambas técnicas utilizan productos químicos para llevar a cabo el procedimiento.
¿Cuál es la diferencia entre el ensayo de micronúcleo y cometa?
El ensayo de micronúcleos es importante para comprobar el daño cromosómico como consecuencia de la exposición a mutágenos, mientras que el ensayo cometa es importante para detectar daños primarios en el ADN de células individuales. Por lo tanto, esta es la diferencia clave entre el micronúcleo y el ensayo del cometa. Además, el ensayo de micronúcleos está bien establecido para detectar clastogenicidad y aneugenicidad. El ensayo del cometa se utiliza como prueba de genotoxicidad para detectar daños primarios en el ADN de las células. Además, un ensayo de micronúcleo proporciona información sobre la estabilidad de los productos químicos, mientras que un ensayo de cometa es una electroforesis en gel de una sola célula.
La siguiente infografía presenta las diferencias entre el micronúcleo y el ensayo cometa en forma tabular para una comparación lado a lado.
Resumen: Ensayo de micronúcleo frente a cometa
Los ensayos de genotoxicidad ayudan a evaluar las posibilidades de mutaciones y anomalías cromosómicas. El ensayo de micronúcleo y el ensayo de cometa son dos técnicas en los ensayos de genotoxicidad. El ensayo de micronúcleos evalúa el daño cromosómico como consecuencia de la exposición a mutágenos. El ensayo Comet es una técnica sencilla y sensible para detectar daños en el ADN. Entonces, esta es la diferencia clave entre el micronúcleo y el ensayo del cometa. El ensayo de micronúcleos es importante en la detección de sustancias químicas que provocan la formación de husos y micronúcleos. El ensayo Comet participa en la encapsulación de células en suspensiones de agarosa de bajo punto de fusión, la lisis de células en condiciones neutras o alcalinas y la electroforesis de células lisadas suspendidas.
