La diferencia clave entre HPLC y UPLC es que HPLC permite el análisis de partículas que tienen un tamaño de alrededor de 5 micrómetros, mientras que UPLC permite el análisis de partículas mucho más pequeñas de alrededor de 2 micrómetros.
HPLC y UPLC son técnicas de cromatografía líquida que son útiles para separar los componentes de un compuesto. Para saber la diferencia entre HPLC y UPLC, primero debemos saber qué es HPLC. Esto se debe a que UPLC es una versión especial de HPLC y podemos entenderlo fácilmente si sabemos qué es HPLC.
¿Qué es HPLC?
El término HPLC significa cromatografía líquida de alta resolución. Es una técnica que podemos usar para separar diferentes constituyentes de un compuesto. Además, es la técnica más utilizada para identificar, cuantificar y separar los componentes de una mezcla. Además, esta técnica utiliza una alta presión para empujar los solventes a través de la columna. Además, las principales aplicaciones de HPLC se encuentran en bioquímica para el análisis de constituyentes de un compuesto. Es una forma ideal para la separación e identificación de aminoácidos, ácidos nucleicos, proteínas, hidrocarburos, pesticidas, carbohidratos, antibióticos, esteroides e innumerables otras sustancias inorgánicas.
Figura 01: Sistema HPLC en un laboratorio
En resumen, el método de operación de la técnica HPLC es el siguiente. En primer lugar, debemos introducir la muestra en la corriente de fase móvil en pequeñas cantidades discretas usando una bomba. La presión de la bomba debe mantenerse a 40 MPa. Luego, esta corriente de fase móvil se filtra a través de la columna de HPLC. Además, los componentes de la muestra pasan a través de la columna. Sin embargo, sus velocidades de movimiento son diferentes entre sí. Esta diferencia surge debido a la diferencia en las interacciones entre los componentes de la muestra y el adsorbente dentro de la columna. Llamamos a este adsorbente como la fase estacionaria porque reside dentro de la columna (sin moverse). En segundo lugar, al final de la columna, podemos recoger la muestra que eluye de la columna. Allí podemos determinar las diferencias en los tiempos de retención para cada componente de la muestra.
¿Qué es UPLC?
El término UPLC significa cromatografía líquida de rendimiento ultra alto. Es una variación de HPLC, pero el método de operación es el mismo. Sin embargo, a diferencia de la HPLC, este método permite analizar partículas muy pequeñas, como partículas pequeñas de 2 micrómetros.
Figura 02: Un dispositivo UPLC
Además, proporciona un análisis más rápido. En esta técnica, utilizamos una presión de bomba de 100 MPa para la inserción de la muestra en la columna. Por lo tanto, esta alta presión confirma que toda la muestra se introduce en la columna. Por lo tanto, esto es muy eficiente en comparación con HPLC.
¿Cuál es la diferencia entre HPLC y UPLC?
El término HPLC significa cromatografía líquida de alto rendimiento, mientras que el término UPLC significa cromatografía líquida de ultra alto rendimiento. Por lo tanto, la técnica UPLC es una versión desarrollada de HPLC. Por lo tanto, el método de operación es el mismo para ambas técnicas. Sin embargo, UPLC es más eficiente en comparación con HPLC porque utiliza una bomba de alta presión; la presión de la bomba para HPLC es de 40 MPa mientras que para UPLC es de 100 MPa. Por lo tanto, esta es una diferencia entre HPLC y UPLC. Sobre todo, la diferencia clave entre HPLC y UPLC es que HPLC permite el análisis de partículas que tienen un tamaño de alrededor de 5 micrómetros, mientras que UPLC permite partículas mucho más pequeñas de alrededor de 2 micrómetros.
Resumen: HPLC frente a UPLC
UPLC es una forma de HPLC. Por lo tanto, los métodos de operación son los mismos. Pero podemos encontrar algunas características mejoradas en UPLC en comparación con HPLC. Por lo tanto, existe alguna diferencia entre HPLC y UPLC. Sin embargo, la diferencia clave entre HPLC y UPLC es que HPLC permite el análisis de partículas que tienen un tamaño de alrededor de 5 micrómetros, mientras que UPLC permite partículas mucho más pequeñas de alrededor de 2 micrómetros.
