La diferencia clave entre la HPLC y la HPLC rápida es que la presión de la bomba que usamos para la HPLC es de alrededor de 40 MPa, mientras que la presión de la bomba para la HPLC rápida es de alrededor de 3-5 MPa.
La técnica más común que usamos para separar los componentes de una mezcla es la "cromatografía líquida". Existen varias técnicas para lograr este propósito, de las cuales HPLC es muy popular. HPLC significa cromatografía líquida de alto rendimiento que identifica, cuantifica y separa los componentes de una mezcla líquida de manera rápida y eficiente. Fast HPLC es una aplicación especial de HPLC que últimamente ha llamado la atención de aquellos involucrados en el estudio de soluciones.
¿Qué es HPLC?
HPLC es cromatografía líquida de alta resolución. Hace uso de una alta presión para empujar los solventes para que pasen a través de una columna. Además, es una forma ideal de separar y estudiar varios compuestos como aminoácidos, ácidos nucleicos, carbohidratos, esteroides, antibióticos e hidrocarburos. La HPLC tiene muchas ventajas sobre otros métodos de separación de mezclas, como una mayor resolución y un análisis más rápido. Elimina la necesidad de volver a empaquetar y regenerar y ofrece un mejor control sobre los parámetros y, por lo tanto, aumenta la eficiencia de la separación. Idealmente, HPLC se adapta a aplicaciones a gran escala, ya que puede separar partículas muy pequeñas y permite el uso de altas presiones que facilitan que los solventes fluyan fácilmente.
Figura 01: Columna HPLC
En resumen, el método de operación de la técnica HPLC es el siguiente. Primero, debemos introducir la muestra en la corriente de fase móvil en pequeñas cantidades discretas usando una bomba. La presión de la bomba debe mantenerse a 40 MPa. Esta corriente de fase móvil se filtra a través de la columna de HPLC. Luego, los componentes de la muestra también pasan a través de la columna. Sin embargo, sus velocidades de movimiento difieren entre sí debido a la diferencia en las interacciones entre los componentes de la muestra y el adsorbente dentro de la columna. Llamamos a este adsorbente como la fase estacionaria porque reside dentro de la columna (sin moverse). Luego, al final de la columna, podemos recolectar la muestra que eluye de la columna, por lo tanto, podemos recolectar los componentes de la muestra por separado.
¿Qué es la HPLC rápida?
Recientemente, los científicos investigadores del instituto de investigación Schering Plough desarrollaron una técnica de HPLC rápida que es una versión avanzada de HPLC, ya que permite una separación aún más rápida de los compuestos de una mezcla. Además, conocida como HPLC rápida, esta técnica utiliza partículas de sílice de núcleo fundido de 2,7 um que se fabrican fusionando sílice porosa de 0,5 um sobre una partícula de sílice sólida. Estas partículas de fabricación única hacen que el procedimiento de separación sea muy rápido y también a una contrapresión más baja que la que usamos en HPLC.
Figura 02: Aparato FPLC
La HPLC rápida obtiene resultados comparables con la UPLC, pero los científicos consideran que esta técnica es superior ya que no requiere equipos de ultra alta presión muy costosos. Lo bueno es que la HPLC rápida no requiere nuevos protocolos de laboratorio.
¿Cuál es la diferencia entre HPLC y HPLC rápida?
HPLC es cromatografía líquida de alto rendimiento y HPLC rápida es una forma avanzada de cromatografía líquida de alto rendimiento. La diferencia clave entre la HPLC y la HPLC rápida es que la presión de la bomba que usamos para la HPLC es de alrededor de 40 MPa. Mientras que la presión de la bomba para la HPLC rápida es de alrededor de 3-5 MPa. Además, podemos separar diferentes compuestos como aminoácidos, ácidos nucleicos, carbohidratos, esteroides, antibióticos e hidrocarburos utilizando la técnica de HPLC, mientras que la técnica de HPLC rápida se utiliza principalmente para la separación de proteínas.
La siguiente infografía presenta más información sobre la diferencia entre HPLC y HPLC rápida.
Resumen: HPLC frente a HPLC rápida
HPLC es una técnica de cromatografía líquida que se ha vuelto muy popular en todo el mundo. Fast HPLC es una nueva versión de HPLC, los científicos de investigación del Schering Plough Institute desarrollaron esta nueva técnica. La diferencia clave entre la HPLC y la HPLC rápida radica en la presión de la bomba que usamos para la separación. Eso es; la presión de la bomba que usamos para HPLC es de alrededor de 40 MPa. Sin embargo, la presión de la bomba para la HPLC rápida es de alrededor de 3-5 MPa.
