La diferencia clave entre la electroforesis en gel de agarosa y la de poliacrilamida es que la electroforesis en gel de agarosa utiliza geles de agarosa vertidos horizontalmente para separar fragmentos de ADN comparativamente más grandes, mientras que la electroforesis en gel de poliacrilamida utiliza geles de poliacrilamida vertidos verticalmente para separar fragmentos de ácido nucleico más cortos.
La electroforesis es un tipo de técnica que utiliza un campo eléctrico aplicado a través de una matriz de gel para separar biomoléculas como ADN, ARN y proteínas. Esta separación de biomoléculas como ADN, ARN y proteínas mediante electroforesis se basa en la carga y el tamaño. Las muestras se cargan en los pocillos del gel. Posteriormente, el campo eléctrico se aplica a través del gel. El campo hace que las moléculas cargadas negativamente se muevan hacia el electrodo positivo. La matriz de gel actúa como un tamiz molecular a través del cual las moléculas más pequeñas pasan o viajan rápidamente mientras que las moléculas más grandes se mueven lentamente. Esto permite la separación de moléculas en función de la carga y el tamaño. Por lo tanto, la electroforesis en gel de agarosa y poliacrilamida son dos tipos de técnicas de electroforesis en gel que ayudan principalmente a separar moléculas en función de su tamaño y carga.
¿Qué es la electroforesis en gel de agarosa?
La electroforesis en gel de agarosa es una técnica que utiliza geles de agarosa para separar biomoléculas como el ADN y el ARN. Es una técnica utilizada para separar los ácidos nucleicos principalmente por tamaño. El compuesto principal llamado agarosa utilizado en esta técnica es un polisacárido. Proviene de las algas. La agarosa se puede disolver en un tampón de ebullición y luego se puede verter en una bandeja que se mantiene horizontal. En la bandeja, se solidifica cuando se enfría para formar una losa. Los geles de agarosa se vierten con un peine colocado para formar pocillos en los que se cargan ácidos nucleicos como el ADN o el ARN una vez que el gel se ha solidificado.
Figura 01: Electroforesis en gel de agarosa
El gel se sumerge luego en un tampón apropiado y se aplica una corriente a través del gel. El ADN tiene una carga negativa uniforme que es independiente de la composición secuencial de la molécula. Por lo tanto, las moléculas de ADN migrarán desde el cátodo (-) hacia el ánodo (+). La tasa de migración depende directamente del tamaño de la molécula. Las macromoléculas más grandes tienen más dificultades para navegar a través del gel. Por otro lado, las macromoléculas más pequeñas se deslizan a través del gel con rapidez y bastante facilidad.
¿Qué es la electroforesis en gel de poliacrilamida?
La electroforesis en gel de poliacrilamida (PAGE) es una técnica que utiliza geles de poliacrilamida para separar biomoléculas. Es una técnica muy utilizada para separar macromoléculas biológicas, generalmente proteínas y ácidos nucleicos, según su movilidad electroforética. La hidratación del acrilonitrilo da como resultado la formación de moléculas de acrilamida por la nitrilo hidratasa. La acrilamida es soluble en agua, y tras la adición de iniciadores de radicales libres, la acrilamida se polimeriza, dando como resultado la formación de gel de poliacrilamida. Normalmente, las concentraciones aumentadas de acrilamida dan como resultado una disminución del tamaño de los poros en el gel. Los geles de poliacrilamida se vierten verticalmente, a diferencia de los geles de agarosa.
Figura 02: Electroforesis en gel de poliacrilamida
En la electroforesis en gel de poliacrilamida, las moléculas pueden funcionar en su estado nativo, conservando la estructura de orden superior de las moléculas. Este método se llama PÁGINA nativa. Alternativamente, también se puede agregar un desnaturalizante químico para eliminar la estructura de orden superior y convertir la molécula en una molécula no estructurada cuya movilidad depende solo de su longitud. Este tipo se llama SDS-PAGE.
¿Cuáles son las similitudes entre la agarosa y la electroforesis en gel de poliacrilamida?
- La electroforesis en gel de agarosa y poliacrilamida son dos tipos de técnicas de electroforesis en gel.
- De hecho, son técnicas de biología molecular.
- Ambas técnicas se utilizan para detectar macromoléculas biológicas como el ADN y las proteínas.
- Estas técnicas son realizadas por técnicos o investigadores calificados.
- En ambas técnicas, la separación de macromoléculas se basa en la carga y el tamaño.
- Ambas técnicas permiten la separación de ácidos nucleicos como el ADN y el ARN.
¿Cuál es la diferencia entre la electroforesis en gel de agarosa y poliacrilamida?
La electroforesis en gel de agarosa es una técnica que utiliza geles de agarosa vertidos horizontalmente para separar biomoléculas, mientras que la electroforesis en gel de poliacrilamida es una técnica que utiliza geles de poliacrilamida vertidos verticalmente para separar biomoléculas. Esta es la diferencia clave entre la electroforesis en gel de agarosa y poliacrilamida. Además, la electroforesis en gel de agarosa se usa para la separación de ADN y ARN, mientras que la electroforesis en gel de poliacrilamida se usa para la separación de ácidos nucleicos como ADN, ARN o proteínas.
La siguiente tabla resume la diferencia entre la electroforesis en gel de agarosa y poliacrilamida.
Resumen: agarosa frente a electroforesis en gel de poliacrilamida
La electroforesis en gel de agarosa y poliacrilamida son dos tipos de técnicas de electroforesis en gel utilizadas en los laboratorios de biología molecular. La electroforesis en gel de agarosa utiliza un gel de agarosa para separar las biomoléculas. La agarosa generalmente no es tóxica para los humanos, mientras que la poliacrilamida es tóxica para los humanos. Además, la electroforesis en gel de agarosa muestra una resolución baja, mientras que la electroforesis en gel de poliacrilamida muestra una resolución mayor. La electroforesis en gel de poliacrilamida utiliza un gel de poliacrilamida para separar las biomoléculas. Esto resume la diferencia entre la electroforesis en gel de agarosa y de poliacrilamida
