La diferencia clave entre la inmunoprecipitación y la coinmunoprecipitación es que la inmunoprecipitación es una técnica que precipita una proteína fuera de la solución usando un anticuerpo específico, mientras que la coinmunoprecipitación es una técnica que precipita complejos proteicos intactos fuera de la solución usando un anticuerpo específico.
La interacción antígeno-anticuerpo es una interacción química específica entre los anticuerpos producidos por las células B y los antígenos (proteínas) durante una reacción inmunitaria. Normalmente, los antígenos solubles se combinan con anticuerpos solubles en presencia de un electrolito a temperatura y pH solubles para formar un complejo visible insoluble. Esto se llama una reacción de precipitación. Por lo tanto, la inmunoprecipitación y la coinmunoprecipitación son dos tipos de reacciones de precipitación que se utilizan habitualmente en los laboratorios para identificar proteínas como los antígenos.
¿Qué es la inmunoprecipitación?
La inmunoprecipitación es una técnica para precipitar una proteína de una solución usando un anticuerpo específico. A veces, esta técnica también se conoce como inmunoprecipitación de proteína individual. La inmunoprecipitación utiliza un anticuerpo para aislar una proteína seleccionada de interés del lisado celular. El anticuerpo purifica su proteína o antígeno diana específico a partir de una mezcla. El anticuerpo se une a la proteína y el complejo antígeno-anticuerpo se extrae de la muestra. En la configuración experimental, el complejo antígeno-anticuerpo se extrae utilizando perlas magnéticas o agarosa acoplada con proteína A/G. Posteriormente, se lavan las perlas y se eluye la proteína de interés. La proteína o antígeno purificado obtenido por inmunoprecipitación se verifica mediante una variedad de técnicas, como el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA) y el western blot (WB).
Figura 01: Inmunoprecipitación
Además, las proteínas o los antígenos aislados se pueden cuantificar e identificar mediante espectrometría de masas utilizando patrones de digestión enzimática basados en la secuencia primaria. Hay ciertas consideraciones antes de comenzar un experimento de inmunoprecipitación: elección del formato del método, unión de proteínas y microesferas, elección del isotipo y el anticuerpo primario correctos, y control negativo.
¿Qué es la coinmunoprecipitación?
La coinmunoprecipitación es una técnica para precipitar complejos proteicos intactos fuera de la solución utilizando un anticuerpo específico. La coinmunoprecipitación generalmente funciona seleccionando un anticuerpo específico que se dirige a una proteína conocida (antígeno) que se cree que es miembro de un complejo más grande de proteínas. Al dirigirse al miembro conocido con un anticuerpo específico, es posible extraer todo el complejo proteico de la solución. Esto permite la identificación de los miembros desconocidos del complejo. El concepto de sacar los complejos de proteínas de la solución a veces se denomina mecanismo de "descenso".
Figura 02: Coinmunoprecipitación B
La coinmunoprecipitación es una poderosa técnica que se utiliza para analizar las interacciones proteína-proteína. El objetivo principal de la coinmunoprecipitación es la identificación de socios que interactúan, como ligandos, cofactores o moléculas de señalización para la proteína de interés. Además, la coinmunoprecipitación es una técnica eficaz que se utiliza para separar proteínas del suero, lisado celular, tejido homogeneizado o medios acondicionados.
¿Cuáles son las similitudes entre la inmunoprecipitación y la coinmunoprecipitación?
- La inmunoprecipitación y la coinmunoprecipitación son dos tipos de técnicas basadas en reacciones de precipitación.
- Ambas técnicas se pueden utilizar para identificar el antígeno diana a través de un anticuerpo específico.
- Ambas técnicas dependen en gran medida de la interacción antígeno-anticuerpo.
- Se utilizan de forma rutinaria en los laboratorios clínicos.
¿Cuál es la diferencia entre inmunoprecipitación y coinmunoprecipitación?
La inmunoprecipitación es una técnica que precipita una proteína fuera de la solución usando un anticuerpo específico, mientras que la coinmunoprecipitación es una técnica que precipita complejos proteicos intactos fuera de la solución usando un anticuerpo específico. Por lo tanto, esta es la diferencia clave entre inmunoprecipitación y coinmunoprecipitación. Además, la inmunoprecipitación se usa más comúnmente en los laboratorios, mientras que la coinmunoprecipitación no se usa comúnmente en los laboratorios.
La siguiente infografía presenta las diferencias entre la inmunoprecipitación y la coinmunoprecipitación en forma tabular para compararlas lado a lado.
Resumen: inmunoprecipitación frente a coinmunoprecipitación
La inmunoprecipitación y la coinmunoprecipitación son dos tipos de técnicas basadas en reacciones de precipitación que dependen de la interacción antígeno-anticuerpo. La técnica de inmunoprecipitación precipita una proteína fuera de la solución usando un anticuerpo específico, mientras que la técnica de coinmunoprecipitación precipita complejos proteicos intactos fuera de la solución usando un anticuerpo específico. Entonces, esto resume la diferencia entre inmunoprecipitación y coinmunoprecipitación.
