La diferencia clave entre el ensayo de proteínas de Bradford y el de Lowry es que el ensayo de proteínas de Bradford se basa en el cambio de absorbancia del colorante azul brillante de Coomassie G-250, mientras que el ensayo de proteínas de Lowry se basa en la reacción de los iones de cobre (Cu+) producido por la oxidación de enlaces peptídicos con el reactivo de Folin-Cioc alteu.
Un ensayo es una técnica analítica que ayuda a caracterizar los principales componentes funcionales de una muestra. Por lo tanto, un ensayo podría ser una prueba cualitativa o cuantitativa. Muchos campos, incluidos la medicina de laboratorio, la farmacología, la biología ambiental, la biología molecular, la bioquímica y la inmunología, utilizan este tipo de ensayos de forma rutinaria. El ensayo de proteínas de Bradford y Lowry son dos ensayos bioquímicos que determinan la concentración de proteínas en una solución de muestra. Ambos ensayos utilizan técnicas colorimétricas para proporcionar resultados.
¿Qué es el ensayo de proteínas de Bradford?
El ensayo de proteínas de Bradford es un procedimiento analítico espectroscópico rápido para el análisis de proteínas. Muestra una alta precisión al medir la concentración de proteína en una solución. Marion Bradford introdujo este procedimiento en 1976. En este ensayo, la reacción total se basa en la composición de aminoácidos de las proteínas medidas. En otros términos, el ensayo de proteínas de Bradford es un ensayo colorimétrico. Utiliza el tinte azul brillante de Coomassie. Por lo tanto, este ensayo colorimétrico de proteínas depende del cambio de absorbancia del colorante. El azul brillante de Coomassie G-250 existe en tres formatos: catiónico (rojo), aniónico (azul) y neutro (verde). Durante condiciones ácidas, la forma roja del tinte se convierte en azul. Confirma la unión de la proteína. Si la proteína no está presente, la solución puede permanecer de color marrón.
Figura 01: Ensayo de proteína de Bradford
El ensayo de proteínas de Bradford se diferencia de otros ensayos de proteínas en que es menos susceptible a las interferencias de varios compuestos químicos presentes en la solución de proteínas. Estos compuestos incluyen sodio, potasio, glucosa y sacarosa, etc.
¿Qué es el ensayo de proteínas de Lowry?
El ensayo de proteína de Lowry es un ensayo bioquímico que se utiliza para determinar el nivel total de proteína en una solución. Oliver H. Lowry es la persona que desarrolló este reactivo en 1940. El procedimiento representa la concentración de proteína total de la solución mediante un cambio de color que es proporcional a la concentración de proteína en la solución. Por lo tanto, este también es un ensayo colorimétrico de proteínas.
La reacción entre los iones de cobre (Cu+) producidos por la oxidación de los enlaces peptídicos y el reactivo de Folin-Cioc alteu es la base de este procedimiento. Además, este reactivo contiene ácido fosfomolíbdico y ácido fosfotúngstico. Sin embargo, el mecanismo de reacción del ensayo de proteínas de Lowry no se comprende bien. Pero se trata de la oxidación de residuos de cisteína, triptófano y tirosina mediante la reducción del reactivo de Folin-Cioc alteu.
Figura 02: Ensayo de proteína de Lowry
Los residuos de cisteína contribuyen a la absorbancia observada en el ensayo de proteínas de Lowry y la reacción da como resultado una molécula azul brillante; heteropoli molibdeno azul. La reducción de esta molécula se mide por absorbancia a 660 nm. Por lo tanto, la concentración de residuos de cisteína y triptófano que redujo el reactivo de Folin-Cioc alteu deduce la concentración total de la proteína en la solución.
¿Cuáles son las similitudes entre el ensayo de proteínas de Bradford y el de Lowry?
- Los ensayos de proteínas de Bradford y Lowry determinan la concentración de proteínas en una solución.
- Ambos métodos son métodos colorimétricos.
- Además, la sensibilidad de ambos métodos es alta.
¿Cuál es la diferencia entre el ensayo de proteínas de Bradford y el de Lowry?
Los ensayos de proteínas de Bradford y Lowry son dos tipos de ensayos que determinan la concentración de proteínas en una solución. El ensayo de proteínas de Bradford se basa en el cambio de absorbancia del colorante azul brillante de Coomassie G-250, mientras que el ensayo de proteínas de Lowry depende de la reacción de los iones de cobre producidos por la oxidación de los enlaces peptídicos, con el reactivo de Folin-Cioc alteu. Entonces, esta es la diferencia clave entre el ensayo de proteínas Bradford y Lowry. El ensayo de proteínas de Bradford tarda 15 minutos en producir un resultado, mientras que el ensayo de proteínas de Lowery tarda entre 40 y 60 minutos en producir un resultado. Por lo tanto, esta es otra diferencia entre el ensayo de proteínas de Bradford y Lowry. Además, el ensayo de proteínas de Bradford depende de la composición de aminoácidos, mientras que el ensayo de proteínas de Lowry depende parcialmente de la composición de aminoácidos. Por lo tanto, esta también es una diferencia entre el ensayo de proteínas de Bradford y el de Lowry.
La siguiente información proporciona más detalles sobre la diferencia entre el ensayo de proteínas de Bradford y el de Lowry.
Resumen: ensayo de proteínas de Bradford frente a Lowry
Un ensayo es una técnica analítica utilizada para caracterizar el principal componente funcional de una muestra. Los ensayos de proteínas de Bradford y Lowry son dos tipos de ensayos de proteínas que funcionan con técnicas colorimétricas. Los ensayos de proteínas de Bradford y Lowry determinan la concentración de proteínas en una solución. Sin embargo, la diferencia clave entre Bradford y Lowry Protein Assay radica en la técnica colorimétrica que utilizan. El ensayo de proteínas de Bradford utiliza el azul brillante G-250 de Coomassie, mientras que el ensayo de proteínas de Lowry utiliza iones de cobre (Cu+) y reactivo de Folin-Cioc alteu. Además, el método de Bradford da resultados más rápidos que el ensayo de proteínas de Lowry. Sin embargo, ambos métodos son métodos muy sensibles y están sujetos a interferencias de varias sustancias.
