Diferencia clave: CFU frente a MPN
La unidad formadora de colonias (CFU) y el número más probable (MPN) son dos métodos utilizados para enumerar microorganismos en muestras. Ambos parámetros se utilizan para detectar la calidad del agua y las bacterias indicadoras fecales en las muestras de agua. La unidad formadora de colonias es una medida utilizada para enumerar el número de células bacterianas o células fúngicas viables en un volumen o peso específico de una muestra determinada. La unidad estándar para este parámetro es UFC/ml o UFC/g. El número más probable es otra unidad utilizada para medir el número de células bacterianas viables en una muestra líquida. La diferencia clave entre CFU y MPN es que CFU se calcula a partir de las colonias bacterianas y fúngicas que crecen en una placa de agar sólida, mientras que MPN se calcula a partir de bacterias viables que crecen en un medio líquido.
¿Qué es CFU?
La unidad formadora de colonias (UFC) es un parámetro que mide el número de células bacterianas o fúngicas viables en una muestra determinada. El método que cuenta las unidades formadoras de colonias se denomina recuento en placa estándar. Las colonias viables que aparecen en las placas de agar se expresan como CFU por 1 ml (unidad formadora de colonias por mililitro) de muestra para líquidos o CFU por 1 g (unidad formadora de colonias por gramo) de muestra para sólidos.
Hay dos métodos comunes que se utilizan para medir las CFU en una muestra. Son el método de placa extendida y el método de placa de vertido. Estos dos métodos están respaldados por una técnica llamada dilución en serie. Las muestras diluidas en serie permiten obtener un número contable de colonias en la superficie del agar. Se puede extender un volumen conocido de muestra sobre la superficie de una placa de agar o mezclar con agar y verter en una placa. Luego se incuba la placa y se cuentan las colonias que surgen. El número de colonias se relaciona con el número de microorganismos dentro de la muestra original. Las placas que muestran demasiadas colonias o muy pocas colonias se excluyen del conteo porque los resultados pueden no ser estadísticamente precisos en esas placas. Estadísticamente, el mejor rango es de 30 a 300 colonias en una placa de agar. Por lo tanto, se deben seleccionar las placas correctas para una enumeración precisa. La dilución en serie se realiza para la función anterior.
Una vez que cuente el número de colonias viables en las placas, puede calcular CFU/ml usando la siguiente ecuación.
CFU por ml de muestra original=número de colonias en una placa X factor de dilución
Factor de dilución=(1/ Dilución de la placa)
Por ejemplo, si obtiene 149 colonias en la placa de la dilución 10-4, entonces la cantidad de bacterias en 1 ml de la muestra original se puede calcular de la siguiente manera:
UFC/ml=(149) x (1/10-4)
=149 × 104 o 1490000
=1. 49 x 106
Figura 01: Unidad formadora de colonias
¿Qué es MPN?
El número más probable es una medida alternativa a UFC/ml. MPN también estima las células viables en una muestra líquida. Cuenta los organismos que crecen en un cultivo líquido y es una técnica predominantemente bacteriológica. Este método es particularmente útil para muestras que contienen bajas concentraciones de células bacterianas; por ejemplo, leche, agua potable, etc. El valor MPN se expresa para 100 ml de volumen. MPN se basa en un método estadístico basado en la teoría de la probabilidad. Hay tablas estadísticas diseñadas para encontrar valores de MPN por 100 ml de la muestra. Estas tablas muestran los resultados con límites de confianza del 95 %.
El valor MPN se calcula después de realizar una técnica llamada método de fermentación en tubos múltiples. Se inoculan tres juegos de tubos que contienen un medio de cultivo adecuado con tres volúmenes diferentes de la muestra, como 10 ml, 1 ml y 0.1 ml y se incuba para el crecimiento. Después del período de incubación, los tubos se califican + (positivo) o – (negativo) para la presencia o ausencia de crecimiento. El patrón de resultados positivos y negativos luego se compara con una tabla MPN de probabilidades estadísticas para estimar el número de microorganismos. Luego se da el valor de MPN para 100 ml de la muestra. MPN se usa ampliamente para detectar bacterias coliformes presentes en muestras de agua.
Figura 02: tabla MPN
¿Cuál es la diferencia entre CFU y MPN?
UFC frente a MPN |
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| CFU es una medida utilizada para expresar el número de colonias bacterianas u fúngicas viables en una muestra determinada. | MPN es una medida alternativa a CFU y mide el número de células bacterianas viables en una muestra líquida. |
| Unidad | |
| UFC/ml o UFC/g | NMP/100 ml |
| Cálculo | |
| CFU se calcula contando el número de colonias cultivadas en placas de agar. | MPN se calcula comparando patrones positivos y negativos de los tubos con la tabla estadística MPN. |
| Técnica de dilución en serie | |
| La dilución en serie se realiza antes de colocar las muestras en placas de agar. | La dilución en serie normalmente no se realiza cuando se calcula el MPN |
| Métodos | |
| El método de la placa extendida y el método de la placa de vertido son dos tipos de métodos que se realizan para obtener CFU. | La fermentación en tubos múltiples es el método que se realiza para obtener el valor de MPN. |
Resumen: UFC frente a MPN
La medición del crecimiento microbiano es necesaria por muchas razones. En las plantas de procesamiento de alimentos, es necesario medir el nivel y el tipo de microorganismos en los alimentos. En la industria alimentaria y la medicina, es necesario asegurarse de que los tratamientos de esterilización se aplican de forma eficaz. En las plantas de tratamiento de aguas residuales, se requiere realizar un recuento microbiano de forma rutinaria. Al optimizar el procedimiento en biología molecular, se requiere medir el número de colonias en las placas. Por lo tanto, existen diferentes métodos de enumeración y medición del crecimiento disponibles. CFU y MPN son dos de estos métodos que se están adoptando ampliamente en varios campos. CFU es una medida del número de colonias bacterianas y fúngicas viables presentes en una muestra determinada. Se calcula utilizando el método de recuento de placas estándar o el método de recuento de placas viables. MPN es otra medida que expresa el número de células bacterianas presentes en un volumen dado de la muestra líquida. Se calcula utilizando el método de fermentación en tubos múltiples y la tabla MPN. Esta es la diferencia entre CFU y MPN.
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