Diferencia clave: nitrocelulosa frente a membrana de nailon
Blotting es una técnica importante para la detección de secuencias específicas de ADN, ARN y proteínas a partir de sus mezclas en biología molecular. Se realiza mediante una membrana llamada blot. Existen diferentes técnicas de transferencia, como transferencia norte, sur y oeste. La selección de una membrana adecuada para el proceso de transferencia debe realizarse con cuidado para evitar la unión no específica y las detecciones incorrectas. La nitrocelulosa, el nailon y el PVDF son membranas de uso común en las técnicas de transferencia. Tienen diferentes características. La diferencia clave entre la nitrocelulosa y la membrana de nailon es que las membranas de nitrocelulosa tienen un alto potencial de inmovilización de proteínas, mientras que las membranas de nailon tienen un alto potencial de inmovilización de ácidos nucleicos. Sin embargo, ambos tipos de membranas se utilizan con frecuencia en las técnicas de transferencia.
¿Qué es una membrana de nitrocelulosa?
La membrana de nitrocelulosa es un filtro de membrana comúnmente utilizado en técnicas de transferencia de proteínas y ácidos nucleicos. Tiene un alto potencial de unión a proteínas. Por lo tanto, las membranas de nitrocelulosa se utilizan ampliamente en la técnica de transferencia Western. Las membranas de nitrocelulosa son compatibles con todas las técnicas de hibridación y muestran capacidades de unión superiores sin interferencias. Las membranas de nitrocelulosa son naturalmente hidrófilas por naturaleza. Hacen una interacción hidrófila con las moléculas y las inmovilizan de manera eficiente en la membrana. Las membranas comerciales de nitrocelulosa están disponibles en dos tamaños de poro: 0,45 y 0,2 µm.
Figura 01: Membrana de nitrocelulosa utilizada en transferencia Western
¿Qué es una membrana de nailon?
La membrana de nailon es otro tipo de membrana comercial utilizada en las técnicas de transferencia. Se utiliza alternativamente con membranas de nitrocelulosa para transferencias del sur y del norte. Las membranas de nailon son ideales para la transferencia Southern que la nitrocelulosa debido a su alta afinidad para unirse con el ADN. Debido a varias características únicas de las membranas de nailon, los investigadores suelen utilizar membranas de nailon para transferencias del sur y del norte en lugar de membranas de nitrocelulosa. Las membranas de nailon también se recomiendan para pelar y reprobar, a diferencia de la nitrocelulosa.
Figura 02: Membrana de nailon utilizada para transferencia Southern
¿Cuál es la diferencia entre la nitrocelulosa y la membrana de nailon?
Nitrocelulosa frente a membrana de nailon |
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| Las membranas de nitrocelulosa son frágiles. | Las membranas de nailon son menos frágiles. |
| Manipulación | |
| Son difíciles de manejar. | Son fáciles de manejar. |
| Reprobación | |
| Las membranas de nitrocelulosa sin soporte son difíciles de reprobar. | Reprobar es fácil con membranas de nailon. |
| Compatibilidad con diversas condiciones de almacenamiento | |
| Las membranas de nitrocelulosa tienen menos resistencia para resistir diversas condiciones de almacenamiento. | Las membranas de nailon responden con mayor solidez a diversas condiciones de almacenamiento. |
| Usar | |
| Se requiere humectación previa. | No es necesario humedecer previamente las membranas de nailon. |
| Naturaleza hidrófila | |
| Las membranas de nitrocelulosa son hidrofílicas por naturaleza, pero menos hidrofílicas que las membranas de nailon. | Son altamente hidrofílicos por naturaleza. |
| Potencial de inmovilización | |
| Las membranas de nitrocelulosa tienen menos afinidad por los ácidos nucleicos. Pero tiene una gran afinidad por las proteínas. | Las membranas de nylon tienen un alto potencial de unión con los ácidos nucleicos que las membranas de nitrocelulosa. |
Resumen: nitrocelulosa frente a membrana de nailon
Las membranas de nitrocelulosa y nailon son láminas especiales que se utilizan en la técnica de transferencia para reproducir el patrón de bandas en el gel. Permiten la posibilidad de detectar una secuencia específica o una proteína de las mezclas inmovilizándolas en la membrana. Una vez inmovilizadas las moléculas en la membrana, se puede utilizar como sustrato para análisis de hibridación con sondas marcadas. La membrana de nitrocelulosa se usa comúnmente para la detección de proteínas en la técnica de transferencia Western debido a su alta afinidad de unión con las proteínas. Las membranas de nailon se utilizan a menudo para transferencias del sur y del norte. Esta es la diferencia entre la nitrocelulosa y la membrana de nailon.
