Diferencia clave: HPLC frente a LCMS
Primero veamos el significado de HPLC y LCMS antes de analizar la diferencia entre HPLC y LCMS. La cromatografía es una técnica de separación en el análisis químico donde los componentes de la muestra se separan durante el paso a través de un medio cromatográfico. También implica la interacción con la muestra, la fase estacionaria y la fase móvil. HPLC significa cromatografía líquida de alto rendimiento y se utiliza como método de cromatografía líquida en química analítica. La combinación de cromatografía líquida y espectroscopia de masas (LCMS) se ha desarrollado para el análisis cuantitativo de biomoléculas seleccionadas y es un procedimiento de ensayo altamente sensible, preciso y específico en comparación con HPLC. Esta es la diferencia clave entre HPLC y LCMC. Este artículo le presentará HPLC y LCMC que se ocupan del análisis químico y analizará las diferencias entre HPLC y LCMS.
¿Qué es HPLC?
La cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) es una técnica de separación popular en química analítica. Se utiliza principalmente para separar los componentes, identificar y cuantificar cada componente de una mezcla. Anteriormente, este método se conocía como cromatografía líquida de alta presión porque dependía de bombas para hacer fluir un solvente líquido presurizado que comprendía la mezcla de muestra a través de una columna rellena con un material adsorbente sólido. Todos y cada uno de los constituyentes de la mezcla de muestra interactúan de manera diferente con el material adsorbente sólido, lo que da como resultado diferentes velocidades de flujo para diferentes constituyentes. Esto puede conducir a la separación de los constituyentes a medida que salen de la columna de HPLC.
HPLC se ha utilizado para diversas aplicaciones, como el análisis de los niveles de vitamina D en la sangre, el uso ilegal de drogas por parte de los atletas mediante la detección de residuos de drogas en la orina, la clasificación de los constituyentes de una muestra biológica compleja con fines de investigación y análisis. y fabricación de productos farmacéuticos.
¿Qué es LCMS?
La cromatografía líquida-espectrometría de masas (LCMS) es una técnica analítica que combina las capacidades de separación física de la cromatografía líquida con las capacidades de análisis de masas de la espectrometría de masas (MS). La cromatografía líquida es una técnica de separación y la espectrometría de masas se utiliza para analizar la relación masa-carga de las partículas cargadas. La separación física generalmente se logra mediante HPLC y, alternativamente, LCMS, también conocida como HPLC-MS. LCMS es una técnica analítica dominante que tiene una precisión, sensibilidad y especificidad muy altas en comparación con HPLC. Por lo tanto, es útil en muchas aplicaciones, como fines de investigación, análisis de medicamentos, análisis de alimentos, etc. LCMS se utiliza principalmente para separar, detectar, identificar y cuantificar las propiedades bioquímicas de una muestra particular en presencia de mezclas químicas complejas.
¿Cuál es la diferencia entre HPLC y LCMC?
Siglas y definición de HPLC y LCMC
HPLC: HPLC significa cromatografía líquida de alto rendimiento. Es una técnica de separación que se utiliza principalmente para separar los componentes, identificar y cuantificar cada componente de una mezcla.
LCMS: LCMS significa cromatografía líquida y espectrometría de masas. Es una técnica analítica que combina las capacidades de separación física de la cromatografía líquida con las capacidades de análisis de masas de la espectrometría de masas (MS).
Características de HPLC y LCMC
Clasificación
HPLC: este es solo un método de cromatografía líquida.
LCMS: Esta es una combinación del método de cromatografía líquida y el método de espectrometría de masas.
Eficiencia
HPLC: en comparación con LCMS, el análisis de HPLC es menos eficiente y más lento.
LCMS: en comparación con HPLC, el análisis LCMS es eficiente y más rápido.
Sensibilidad
HPLC: en comparación con LCMS, el análisis de HPLC es menos sensible.
LCMS: En comparación con HPLC, el análisis LCMS es más sensible.
Especificidad
HPLC: en comparación con LCMS, el análisis de HPLC es menos específico.
LCMS: en comparación con HPLC, el análisis LCMS es más específico.
Precisión
HPLC: HPLC proporciona resultados menos precisos que LCMS para la determinación de algunos productos químicos.
LCMS: LCMS proporciona resultados más precisos que HPLC para la determinación de algunos productos químicos.
Componente
HPLC: HPLC puede considerarse como un componente de LCMS.
LCMS: LCMS no se puede considerar como un componente de HPLC.
Fuente de iones
HPLC: la fuente de iones no existe en el instrumento de HPLC.
LCMS: la fuente de iones está presente en el instrumento LCMS.
Aplicaciones
HPLC: Los iones, polímeros, moléculas orgánicas y biomoléculas se pueden analizar mediante HPLC.
LCMS: Se pueden analizar moléculas orgánicas y biomoléculas. A diferencia de HPLC, LCMS se puede utilizar para examinar mezclas resueltas de forma incompleta.
Operación
HPLC: el diagrama de un instrumento de HPLC se muestra en la figura 1 y, por lo general, incluye un inyector automático, bombas y un detector. El muestreador introduce la mezcla de la muestra en la fase móvil (mezcla presurizada de disolventes como agua, acetonitrilo y/o metanol) que la transfiere a la columna. Las bombas entregan el flujo y la composición deseados de la fase móvil a través de la columna. La columna se llena con el adsorbente, que es una partícula sólida granulosa como sílice o polímeros. El detector produce una señal proporcional a la cantidad de presencia de componentes de la muestra en la columna, lo que permite un análisis cuantificable de los componentes de la muestra seleccionados. El instrumento de HPLC está controlado y el análisis de datos lo proporciona un microprocesador digital y un software de usuario.
Figura 1: Diagrama del instrumento HPLC
LCMS: El diagrama del instrumento LCMS se muestra en la figura 2. El extracto de muestra se inserta en la columna que consta de HPLC. Esta columna retiene los metabolitos de la muestra en función de los caracteres físicos, y diferentes metabolitos fluyen hacia el espectrómetro de masas en diferentes intervalos de tiempo. La espectroscopia de masas se utiliza para evaluar masas de partículas, determinar la disposición elemental de una molécula y aclarar las estructuras de las moléculas. Sin embargo, la muestra debe ionizarse para generar moléculas cargadas a fin de determinar sus proporciones de masa a carga. Por lo tanto, en lugar de instrumentos de HPLC, LCMS consta de tres módulos adicionales, como una fuente de hierro, un analizador de masas y un detector. Una fuente de iones puede transformar la muestra en fase gaseosa en iones y un analizador de masas agrupa los iones por sus masas usando campos electromagnéticos. Finalmente, un detector cuantifica los valores y entrega datos de cada ion presente en la muestra. La técnica LCMS se puede utilizar tanto para aplicaciones cualitativas como cuantitativas.
Figura 2: Diagrama del instrumento LCMS
En conclusión, HPLC es un método de cromatografía líquida, mientras que LCMS es una combinación de cromatografía líquida y espectrometría de masas. Ambas técnicas de análisis tienen características diferentes, pero se pueden utilizar para identificar y cuantificar composiciones de alimentos, productos farmacéuticos y otras moléculas bioactivas.
