La diferencia clave entre la elución isocrática y en gradiente es que la elución isocrática se refiere a mantener una concentración constante en la fase móvil, mientras que la elución en gradiente se refiere a mantener una concentración variable en la fase móvil.
Los términos isocrático y elución en gradiente se utilizan en cromatografía. Durante una ejecución cromatográfica, usamos una fase estacionaria, que es una sustancia que no se mueve, junto con una fase móvil, la sustancia que se mueve. La elución isocrática y en gradiente describe las propiedades de la fase móvil.
¿Qué es la elución isocrática?
Elución isocrática es un término utilizado en cromatografía cuando la fase móvil tiene una concentración constante. Aquí, la concentración de la fase móvil es constante durante todo el proceso cromatográfico. En este proceso, podemos observar que el ancho del pico aumenta linealmente con el tiempo de retención en el cromatograma. Sin embargo, esto tiene una desventaja: los picos de elución tardía para la elución tardía se vuelven muy planos y anchos. Por lo tanto, estos picos anchos se vuelven difíciles de reconocer como picos.
Además, en la elución isocrática, la selectividad no cambia según las dimensiones de la columna. Esto significa que la selectividad no depende de los cambios en las dimensiones de la columna. Aquí, la longitud y el diámetro se consideran como dimensiones de la columna. Por lo tanto, los picos eluyen en el mismo orden.
¿Qué es la elución en gradiente?
Elución en gradiente es un término utilizado en cromatografía cuando aquí la fase móvil tiene una concentración variable. En otras palabras, la concentración de la fase móvil no tiene por qué permanecer constante. Por ejemplo, en HPLC, un método de separación común utiliza metanol al 10 % inicialmente y termina al 90 %, aumentando la concentración gradualmente. La fase móvil tiene dos componentes: un solvente débil y un solvente fuerte. El solvente débil permite que el soluto eluya lentamente, mientras que el solvente fuerte provoca la elución rápida del soluto. En la cromatografía de fase reversa, usamos agua como solvente débil y solvente orgánico como solvente fuerte.
Figura 01: HPLC
Además, el método de elución en gradiente reduce los componentes que eluyen más tarde para hacerlos eluir más rápido, dando un pico estrecho en el cromatograma. Este método mejora la forma del pico y también la altura del pico. Además, en la técnica de elución en gradiente, el orden de elución cambia con los cambios en las dimensiones de la columna.
¿Cuál es la diferencia entre la elución isocrática y la de gradiente?
Los términos isocrático y elución en gradiente se utilizan en cromatografía. La elución isocrática y en gradiente describen las propiedades de la fase móvil. La diferencia clave entre la elución isocrática y en gradiente es que la elución isocrática se refiere al mantenimiento de una concentración constante en la fase móvil, mientras que la elución en gradiente se refiere al mantenimiento de una concentración variable en la fase móvil.
En la técnica de elución isocrática, el ancho del pico aumenta linealmente con el tiempo de retención. Sin embargo, en la técnica de elución en gradiente, la retención de los componentes que se eluyen más tarde disminuye, de modo que la elución se vuelve más rápida y da picos estrechos. Aparte de eso, en la elución isocrática, la selectividad no depende de las dimensiones de la columna, pero en la elución en gradiente, la selectividad cambia al cambiar las dimensiones de la columna.
La siguiente tabla resume la diferencia entre elución isocrática y en gradiente.
Resumen: elución isocrática frente a gradiente
La elución isocrática y la elución en gradiente describen las propiedades de la fase móvil. La diferencia clave entre la elución isocrática y en gradiente es que la elución isocrática se refiere al mantenimiento de una concentración constante en la fase móvil, mientras que la elución en gradiente se refiere al mantenimiento de una concentración variable en la fase móvil.