La diferencia clave entre la placa de vertido y la placa de extensión es que un volumen conocido de la muestra se extiende sobre la superficie del medio de agar en la placa de extensión, mientras que, en la placa de vertido, un volumen conocido de la muestra se mezcla con agar y luego se vierte en un plato. Al comparar la precisión de estas dos técnicas, la placa de vertido tiene una mayor precisión que la placa extendida.
El método estándar de recuento en placa es un enfoque basado en el crecimiento que cuenta el número de microorganismos vivos (en crecimiento/cultivables/viables) dentro de una muestra. Es un poderoso método en uso, en muchos campos microbiológicos para analizar el número de microorganismos vivos. Los campos tales como alimentos y productos lácteos, médicos, ambientales, acuáticos y agrícolas, genética microbiana, microbiología molecular, desarrollo de medios de crecimiento y biotecnología (tecnología de biorreactores, fermentación, tratamiento de aguas residuales, etc.) utilizan esta técnica. Además, hay dos formas principales de realizar un conteo de placa estándar: la técnica de placa extendida y la técnica de placa vertida.
¿Qué es el plato de vertido?
La técnica de vertido en placa es un método microbiano para enumerar algunas células viables presentes en una muestra. La especialidad del método de vertido en placa es que primero se mezcla un volumen conocido de la muestra con agar y luego se vierte en la placa.
Figura 01: Placa de vertido
Otros pasos son similares a la técnica de la placa extendida que se analiza en la siguiente sección. El siguiente paso después de verter el agar mezclado con la muestra es permitir que se solidifique e incube. Después de la incubación, es esencial contar el número de colonias viables para calcular las CFU finales para 1 g o 1 ml.
¿Qué es la placa extendida?
La placa extendida es una técnica para enumerar células viables en una muestra. Para esta técnica, es necesaria una dilución en serie de la muestra para garantizar que al menos una dé lugar a un número contable de colonias. El proceso aquí consiste en pipetear un volumen fijo de dilución sobre la superficie de una placa de agar y esparcirlo rápida y uniformemente sobre la superficie de agar con un esparcidor de vidrio, que se ha flameado con alcohol y enfriado. Es necesario realizar las réplicas para obtener un valor medio fiable. El siguiente paso es secar estas placas durante un período corto y luego invertirlas y colocarlas en una incubadora a una temperatura adecuada para el crecimiento y durante un período de incubación establecido.
Figura 02: Placa de extensión
Después de la incubación, el examen de las placas mostrará el crecimiento. En una o más diluciones, el número de células presentes en los inoculantes (p. ej., 100 o 200 μl) dará lugar a entre 30 y 300 colonias discretas en la superficie del agar. Menos de 30 recuentos de colonias no son estadísticamente fiables. Los recuentos superiores a 300 son difíciles de enumerar y propensos a errores.
¿Cuáles son las similitudes entre el plato para verter y el plato para esparcir?
- La placa extendida y la placa vertida son dos técnicas para obtener el número de células viables presentes en una muestra.
- Ambos son métodos sencillos.
- Los errores de muestreo pueden ocurrir en ambos métodos.
- Las limitaciones de las condiciones de crecimiento afectan el resultado de ambos métodos.
- Los errores técnicos también pueden interferir en el resultado final de ambos métodos.
- Aunque son viables, los dos métodos no se utilizan para cultivar bacterias no cultivables.
¿Cuál es la diferencia entre el plato para verter y el plato para esparcir?
La placa de vertido es una técnica microbiana para enumerar una cantidad de células viables en una muestra. La técnica de placa extendida es otra técnica para enumerar las bacterias que crecen en la superficie de los medios. En la técnica de la placa de vertido, el proceso consiste en agregar la muestra a la superficie del medio solidificado en la placa de vertido. Pero, en la técnica de la placa esparcida, el proceso consiste en mezclar la muestra con el agar fundido y luego verterlo en la placa.
Con respecto a la precisión de estas dos técnicas, la placa de vertido tiene una mayor precisión que la placa extendida. Además, a diferencia de una placa de vertido, se utiliza un esparcidor de vidrio para esparcir la muestra uniformemente sobre la superficie de una placa esparcida. Además, utilizando la placa de vertido, es posible enumerar los aerobios, anaerobios y anaerobios facultativos. Sin embargo, utilizando la placa de distribución solo es posible enumerar los aerobios. Además, las placas de agar solidificado son necesarias para realizar la placa de extensión, mientras que los medios de agar líquido fundido son necesarios para el método de vertido.
Resumen: verter el plato frente al esparcir el plato
La placa de vertido y la placa de extensión son dos técnicas en microbiología para facilitar la enumeración de células microbianas en una muestra. Ambos métodos se basan en el crecimiento, por lo tanto, miden las células viables. Durante el vertido en placa, un volumen conocido de la muestra se mezcla con el agar fundido y se vierte en la placa. Durante la extensión de la placa, se extiende un volumen conocido sobre la superficie del medio de agar solidificado. Esta es la diferencia entre la placa de vertido y la placa de extensión.
