La diferencia clave entre la microscopía de fluorescencia y la microscopía confocal es que en la microscopía de fluorescencia, toda la muestra se inunda de manera uniforme con la luz de una fuente de luz, mientras que en la microscopía confocal, solo algunos puntos de la muestra se exponen a la luz de una fuente de luz.
La microscopía de fluorescencia es una técnica analítica importante que es útil para estudiar las propiedades de sustancias orgánicas o inorgánicas. La microscopía confocal es una técnica analítica útil para aumentar la resolución óptica y el contraste de una micrografía utilizando un orificio espacial para bloquear la luz desenfocada en la formación de imágenes.
¿Qué es la microscopía de fluorescencia?
La microscopía de fluorescencia es una técnica analítica importante que es útil para estudiar las propiedades de sustancias orgánicas o inorgánicas. El instrumento que utilizamos para esta medida es un microscopio de fluorescencia. Es un tipo de microscopio óptico. Este tipo de microscopio óptico utiliza fluorescencia en lugar de dispersión, reflexión, atenuación y absorción o además de ellos.
Un microscopio de fluorescencia utiliza la fluorescencia para generar una imagen. Puede ser una configuración simple como un microscopio de epifluorescencia o un diseño más complicado, incluido un microscopio confocal que usa corte óptico. Esto ayuda a obtener una mejor resolución de la imagen de fluorescencia.
Figura 01: Microscopio de fluorescencia
Al considerar el principio de la microscopía de fluorescencia, debemos usar la muestra para iluminarla con luz de una longitud de onda específica. Allí, la muestra absorbe la luz de los fluoróforos, lo que hace que emitan luz de longitudes de onda más largas. Es importante separar la luz iluminada de la fluorescencia emitida mucho más débil mediante el uso de un filtro de emisión espectral.
Por lo general, un microscopio de fluorescencia contiene una fuente de luz, un filtro de excitación, un espejo dicroico y un filtro de emisión. La fuente de luz puede ser una lámpara de arco de xenón, una lámpara de vapor de mercurio, LED y láser. El espejo dicroico también se conoce como divisor de haz dicroico.
¿Qué es la microscopía confocal?
La microscopía confocal es una técnica analítica útil para aumentar la resolución óptica y el contraste de una micrografía mediante un orificio espacial para bloquear la luz desenfocada en la formación de imágenes. También se conoce como microscopía de barrido láser confocal o microscopía de barrido confocal láser. Es una técnica de imagen óptica.
En esta técnica microscópica, la captura de múltiples imágenes 2D a diferentes profundidades en una muestra permite la reconstrucción de estructuras 3D dentro de un objeto. La técnica microscópica confocal es muy útil en las comunidades científica e industrial. Suele utilizarse en ciencias de la vida, inspección de semiconductores y ciencia de los materiales.
Figura 02: El principio del sensor de punto confocal de la patente de Minsky
Durante el proceso, la luz viaja a través de la muestra bajo un microscopio convencional hasta donde podría penetrar en la muestra, mientras que un microscopio confocal que solo enfoca un haz de luz más pequeño pasa a través de un nivel de profundidad estrecho a la vez. Esta técnica fue desarrollada por Marvin Minsky en 1957.
¿Cuál es la diferencia entre la microscopía de fluorescencia y la microscopía confocal?
La microscopía de fluorescencia es una técnica analítica importante que es útil para estudiar las propiedades de sustancias orgánicas o inorgánicas. La microscopía confocal es una técnica analítica útil para aumentar la resolución óptica y el contraste de una micrografía utilizando un orificio espacial para bloquear la luz desenfocada en la formación de imágenes. La diferencia clave entre la microscopía de fluorescencia y la microscopía confocal es que, en la microscopía de fluorescencia, toda la muestra se inunda de manera uniforme con la luz de una fuente de luz, mientras que en la microscopía confocal, solo algunos puntos de la muestra se exponen a la luz de una fuente de luz.
La siguiente infografía presenta las diferencias entre la microscopía de fluorescencia y la microscopía confocal en forma tabular para compararlas lado a lado.
Resumen: microscopía de fluorescencia frente a microscopía confocal
La microscopía de fluorescencia y la microscopía confocal son dos técnicas analíticas involucradas en la imagen óptica. La diferencia clave entre la microscopía de fluorescencia y la microscopía confocal es que, en la microscopía de fluorescencia, toda la muestra se inunda de manera uniforme con la luz de una fuente de luz, mientras que en la microscopía confocal, solo algunos puntos de la muestra se exponen a la luz de una fuente de luz.
