La diferencia clave entre el radioinmunoensayo y el ensayo inmunorradiométrico es que en el radioinmunoensayo, la muestra o el compuesto que se va a medir se combina con un antígeno radiactivo antes de la combinación, mientras que en el ensayo inmunorradiométrico, la muestra o el compuesto se combina inmediatamente con el radiomarcado. anticuerpos.
Un inmunoensayo es una prueba bioquímica que detecta la presencia o concentración de macromoléculas en una solución utilizando un anticuerpo o antígeno. Los anticuerpos fluorescentes y radiactivos se utilizan para medir antígenos en una muestra. Inicialmente, los anticuerpos se utilizaron en técnicas de precipitación como inmunoprecipitación, inmunodifusión e inmunoelectroforesis para el análisis de proteínas séricas. En la actualidad, se utilizan técnicas altamente sensibles como el radioinmunoensayo y los ensayos inmunorradiométricos para la medición de fármacos, marcadores tumorales y hormonas.
¿Qué es el ensayo de radioinmunoensayo?
El radioinmunoensayo (RIA) es un inmunoensayo que utiliza elementos radiactivos para la formación gradual de complejos antígeno-anticuerpo. RIA generalmente usa anticuerpos radiactivos para detectar la cantidad de antígeno en una muestra. RIA es un ensayo in vitro muy específico y altamente sensible. El principio detrás de RIA es la vinculación competitiva. Aquí, un antígeno radiactivo compite contra un antígeno no radiactivo por una cantidad constante de sitios de unión a anticuerpos o receptores. RIA requiere licencias y precauciones especiales, ya que se utilizan sustancias radiactivas, y sigue siendo una de las técnicas menos costosas.
Figura 01: Inmunoensayo
Durante RIA, una cantidad conocida de antígeno se vuelve radioactiva con frecuencia marcándola con isótopos radioactivos gamma de yodo unidos a tirosina. Luego, este antígeno se combina con una cantidad conocida de anticuerpo. Aquí, tanto el antígeno como el anticuerpo se unen específicamente entre sí. Luego, se agrega una muestra de suero sanguíneo para iniciar una reacción competitiva entre los antígenos marcados y los antígenos no marcados en el suero con anticuerpos específicos. En esta reacción, los anticuerpos liberan una cierta cantidad de antígeno marcado. Esta cantidad es proporcional a la relación entre el antígeno marcado y el no marcado. Finalmente, se genera una curva de unión para derivar la cantidad de antígeno en el suero sanguíneo de un paciente.
¿Qué es el ensayo inmunorradiométrico?
El ensayo inmunorradiométrico (IRMA) es un inmunoensayo que utiliza anticuerpos radiomarcados. En IRMA, los anticuerpos se marcan con radioisótopos. Estos anticuerpos se unen a los antígenos presentes en una muestra específica. En una muestra positiva, los anticuerpos marcados radiactivamente se unen a los epítopos libres de los antígenos. Esto forma un complejo antígeno-anticuerpo.
Durante la segunda reacción, los anticuerpos marcados que no están unidos se eliminan utilizando un antígeno de fase sólida. El número restante de anticuerpos radiactivos en la solución es una función directa de la concentración de antígeno. IRMA se conoce como un ensayo de exceso de reactivo en el que se utiliza como reactivo una cantidad excesiva de anticuerpo radiomarcado. Aquí, se permite que reaccione una concentración en exceso de anticuerpo o antígeno marcado. Como paso final, se separan los anticuerpos unidos al antígeno y libres, y la fracción unida al antígeno se somete a ensayos radiactivos. Aquí, la actividad de la fracción es directamente proporcional a la concentración del antígeno.
¿Cuáles son las similitudes entre el radioinmunoensayo y el ensayo inmunorradiométrico?
- Tanto el radioinmunoensayo como el ensayo inmunorradiométrico son inmunoensayos que utilizan elementos radiactivos en la formación gradual de complejos antígeno-anticuerpo.
- Forman un complejo antígeno-anticuerpo.
¿Cuál es la diferencia entre el radioinmunoensayo y el ensayo inmunorradiométrico?
El radioinmunoensayo es un inmunoensayo que determina los niveles de anticuerpos mediante un antígeno marcado con un radioisótopo, mientras que el ensayo inmunorradiométrico es un ensayo de exceso de reactivo que utiliza una concentración excesiva de anticuerpo radiomarcado. Por lo tanto, esta es la diferencia clave entre el radioinmunoensayo y el ensayo inmunorradiométrico. IRMA es capaz de proporcionar una mayor sensibilidad que RIA. En RIA, los antígenos se marcan con isótopos de yodo radioactivos gamma, mientras que en IRMA los anticuerpos se marcan con isótopos de yodo. Entonces, esta también es una diferencia entre el radioinmunoensayo y el ensayo inmunorradiométrico. Como IRMA es una técnica de exceso de reactivo, el ensayo se realiza en menos tiempo que RIA.
La siguiente tabla resume las diferencias entre el radioinmunoensayo y el ensayo inmunorradiométrico.
Resumen: Radioinmunoensayo frente a ensayo inmunorradiométrico
El radioinmunoensayo es un inmunoensayo que utiliza elementos radiactivos en formación gradual para determinar los niveles de anticuerpos. RIA generalmente usa anticuerpos radiactivos. Un antígeno radiactivo compite contra un antígeno no radiactivo por una cantidad constante de sitios de unión a anticuerpos o receptores. El ensayo inmunorradiométrico es un inmunoensayo que se lleva a cabo para determinar los niveles de antígeno de una muestra utilizando anticuerpos radiomarcados. Estos anticuerpos se unen a los antígenos presentes en una muestra específica. Al final de cada ensayo, se forma un complejo antígeno-anticuerpo. Para obtener los resultados de los ensayos, se dibuja una curva de unión. En el radioinmunoensayo, la cantidad de antígeno marcado es proporcional a la relación entre el antígeno marcado y el no marcado, pero en un ensayo inmunorradiométrico, la actividad de la fracción unida al antígeno es directamente proporcional a la concentración del antígeno. Este es el resumen de la diferencia entre el radioinmunoensayo y el ensayo inmunorradiométrico.
