Diferencia clave: electroforesis en gel frente a SDS Página
La electroforesis en gel es una técnica que separa macromoléculas en un campo eléctrico. Es un método común en biología molecular separar el ADN, el ARN y las proteínas de las mezclas según sus tamaños moleculares. SDS Page es un tipo de electroforesis en gel que se utiliza para separar proteínas de una mezcla de proteínas en función de sus tamaños. La electroforesis en gel es un término utilizado para referirse a la técnica normal aplicada para la separación de ADN, ARN y proteínas, mientras que SDS Page es un tipo de electroforesis en gel. Esta es la diferencia clave entre la electroforesis en gel y la página SDS.
¿Qué es la electroforesis en gel?
La electroforesis en gel es una técnica común utilizada en los laboratorios para separar moléculas cargadas como ADN, ARN, proteínas, etc. de sus mezclas. En la electroforesis en gel se utiliza un gel. Actúa como un tamiz molecular. Hay dos tipos de geles que se utilizan en la electroforesis en gel, a saber, agarosa y poliacrilamida. La selección de un gel y la preparación del gel son factores importantes que deben tenerse en cuenta en las electroforesis en gel, ya que el tamaño de poro del gel debe manipularse cuidadosamente para lograr una buena separación de las moléculas a través de la electroforesis en gel. La electroforesis en gel tiene un campo eléctrico conectado a dos extremos del gel. Un extremo del gel muestra una carga positiva mientras que el otro extremo tiene una carga negativa.
El ADN y el ARN son moléculas cargadas negativamente. Una vez que se cargan en el gel desde el extremo negativo del gel y se aplican al campo eléctrico, migran a través de los poros del gel hacia el extremo cargado positivamente del gel. La velocidad de la migración depende de la carga y del tamaño de la molécula. Las moléculas más pequeñas migran fácilmente a través de los poros del gel que las moléculas más grandes. Por lo tanto, las moléculas más pequeñas viajan una gran distancia a través del gel y las moléculas más grandes viajan una distancia corta. Para observar el desplazamiento de las moléculas en el gel, se utilizan tipos especiales de colorantes. El campo eléctrico se aplica durante un cierto período de tiempo y se detiene para evitar la pérdida de moléculas y mantener las moléculas en sus posiciones de viaje. Se pueden observar diferentes bandas en el gel. Estas bandas representan las moléculas de diferentes tamaños. Por lo tanto, la electroforesis en gel es útil para diferenciar moléculas según sus tamaños.
La electroforesis en gel se incorpora a diversas técnicas como técnica preparatoria en biología molecular, como PCR, RFLP, clonación, secuenciación de ADN, transferencia Southern, mapeo del genoma, etc.
Figura 01: Electroforesis en gel de agarosa
¿Qué es la página SDS?
La electroforesis en gel de poliacrilamida con dodecilsulfato de sodio (página SDS) es un tipo de electroforesis en gel que se utiliza para separar proteínas. Cuando se usa la electroforesis en gel para separar proteínas, se necesitan tratamientos especiales ya que las proteínas no tienen carga negativa como el ADN y el ARN y no migran hacia el extremo positivo o negativo. Por lo tanto, las proteínas se desnaturalizan y se recubren con una carga negativa antes de la electroforesis en gel. Se realiza utilizando un detergente llamado dodecilsulfato de sodio (SDS). La electroforesis en gel que utiliza SDS y un gel de poliacrilamida como medio de soporte se conoce como SDS Page. Esta técnica se usa comúnmente en bioquímica, genética, medicina forense y biología molecular.
Durante la página SDS, las proteínas se mezclan con SDS. SDS despliega las proteínas en una forma lineal y las recubre con una carga negativa proporcional a su masa molecular. Debido a la carga negativa, las moléculas de proteína migran hacia el extremo de carga positiva del gel y se separan según sus masas moleculares. En SDS Page, la poliacrilamida se utiliza como soporte sólido para el gel. La separación real de las proteínas depende principalmente de las propiedades del gel. Por lo tanto, la preparación del gel de poliacrilamida debe realizarse con cuidado y deben usarse las concentraciones correctas de poliacrilamida. Los geles de poliacrilamida muestran una resolución más alta que los geles de agarosa. Por lo tanto, SDS Page se considera una técnica de alta resolución para la separación de proteínas.
SDS Page es un tipo de electroforesis en gel desnaturalizante. Tiene una limitación importante en el análisis de proteínas. Dado que SDS desnaturaliza las proteínas antes de la separación, no permite la detección de actividad enzimática, interacciones de unión a proteínas, cofactores de proteínas, etc.
Figura 02: página SDS
¿Cuál es la diferencia entre la electroforesis en gel y la página SDS?
Electroforesis en gel versus página SDS |
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| La electroforesis en gel es un método que se realiza para separar macromoléculas utilizando un campo eléctrico. | SDS Page es una técnica de electroforesis en gel de alta resolución que se utiliza para separar proteínas en función de su masa. |
| Carrera de gel | |
| Se puede realizar de forma horizontal o vertical. | La página SDS siempre se ejecuta verticalmente. |
| Base para la separación | |
| La separación se produce según la carga y el tamaño. | La separación de proteínas se produce según la masa y la carga. |
| Resolución | |
| La electroforesis en gel de agarosa tiene una resolución baja y la electroforesis en gel de poliacrilamida tiene una resolución más alta | La página SDS tiene una mejor resolución. |
| Desnaturalización | |
| La electroforesis en gel incluye técnicas desnaturalizantes y no desnaturalizantes. | SDS Page desnaturaliza las proteínas antes de la separación. |
Resumen: Electroforesis en gel frente a SDS Página
La electroforesis en gel es una técnica común utilizada para la separación y el análisis de ADN, ARN y proteínas en función de su tamaño y carga. Hay dos tipos principales de electroforesis en gel: electroforesis en gel de agarosa y electroforesis en gel de poliacrilamida. Los geles de agarosa se utilizan principalmente para la separación de ácidos nucleicos; cuando se requiere mayor resolución se utilizan geles de poliacrilamida. SDS Page es un tipo de electroforesis en gel comúnmente utilizada para separar mezclas complejas de proteínas. Se considera una técnica de separación de proteínas de alta resolución. Esta es la diferencia entre la electroforesis en gel y la página SDS.
