Electroforesis vs Electroósmosis
Los métodos de separación física como el filtrado, la destilación y la cromatografía en columna no son métodos fáciles cuando se trata de la separación de algunas moléculas. La electroforesis y la electroósmosis son otras dos técnicas de separación que se pueden utilizar para separar partículas cargadas.
¿Qué es la electroforesis?
La electroforesis es una técnica de separación de moléculas en función de su tamaño. Fundamental para esta separación es la carga de la molécula y su capacidad para moverse en un campo eléctrico. Esta es la técnica más común y principal en biología molecular para separar moléculas, especialmente ADN y proteínas. Esto se usa principalmente porque es relativamente fácil y económico. El aparato para la electroforesis puede ser un poco complicado y su preparación lleva algún tiempo. Pero podemos hacer fácilmente un aparato de electroforesis con las cosas que tenemos en el laboratorio. Las técnicas de electroforesis pueden variar dependiendo de nuestros propósitos. Podemos usar electroforesis unidimensional para la separación de ADN o proteína. La electroforesis bidimensional se usa cuando se requieren muestras más resueltas (como en el caso de la impresión digital). Se utiliza un gel como medio de soporte para separar las moléculas. Este gel se puede preparar como láminas planas o en tubos. La base de este procedimiento es separar moléculas según su velocidad de movimiento a través de un gel cuando se suministra un campo eléctrico. Las moléculas con carga negativa como el ADN tienden a viajar hacia el polo positivo en este campo eléctrico, mientras que las moléculas con carga positiva tienden a viajar hacia el polo negativo. En electroforesis se utilizan dos tipos de geles como agarosa y poliacrilamida. Estos dos tienen diferentes poderes de resolución. El gel actúa como un tamiz para filtrar los diferentes tamaños de moléculas. Las cargas electrostáticas establecidas en el gel actúan como la fuerza.
La separación depende de la movilidad de los iones.
F=v=ZeE
V=ZeE/ f
F=fuerza que actúa sobre una partícula
f=coeficiente de fricción
V=velocidad de migración promedio
Z=carga de la partícula que migra
e=carga elemental
E=fuerza del campo eléctrico
Las condiciones necesarias para la electroforesis son relativamente simples. Al hacer el gel y analizar la muestra, se usa un tampón. Los marcadores y colorantes se utilizan con fines de visualización.
¿Qué es la electroósmosis?
Este es el proceso de mover un líquido a través de un material usando un campo eléctrico aplicado. El movimiento puede ser a través de un material poroso, a lo largo de un capilar, membrana, etc. Esto se puede utilizar como técnica de separación (especialmente electro-ósmosis capilar). La velocidad del líquido es linealmente proporcional al campo eléctrico aplicado. También depende del material utilizado para construir el canal y la solución utilizada. En la interfase, solución y material han obtenido cargas opuestas y esto se conoce como doble capa eléctrica. Cuando se aplica un campo eléctrico a la solución, la doble capa eléctrica se mueve por la fuerza de Coulomb resultante. Esto se conoce como flujo electroosmótico.
¿Cuál es la diferencia entre electroforesis y electroósmosis?
• En la electroforesis, las partículas sólidas (macromoléculas como ácidos nucleicos o proteínas) se mueven mediante un campo eléctrico. Pero en la electroósmosis se mueve un líquido.
• En electroforesis, el material sólido de soporte es un gel. Pero en electro-ósmosis puede ser un gel, membrana, capilar, etc.
