Diferencia clave: hibridación in situ frente a inmunohistoquímica
El diagnóstico del cáncer y las enfermedades infecciosas es una tendencia popular en la que se utilizan técnicas novedosas basadas en la proteómica y la genómica con el fin de identificar tumores o células infecciosas, su proliferación y los sitios de desarrollo celular y analizar la base genética de la mayoría de las células transmisibles y transmisibles. enfermedades no transmisibles. Esto dará como resultado un procesamiento y diseño de medicamentos precisos y el desarrollo de terapias personalizadas para enfermedades. La hibridación in situ (ISH) y la inmunohistoquímica (IHC) son dos técnicas ampliamente utilizadas en la biología del cáncer y la diferencia clave entre la hibridación in situ y la inmunoquímica radica en las moléculas que se utilizan en el procedimiento de análisis. En ISH, las sondas de ácido nucleico se utilizan en el análisis, mientras que en IHC, los anticuerpos monoclonales y policlonales se utilizan para las determinaciones de diagnóstico.
¿Qué es la hibridación in situ (ISH)?
La hibridación in situ es una técnica de hibridación de ácidos nucleicos que se realiza directamente en una porción o sección de tejido, en todo el tejido o en células. La técnica depende de la teoría del apareamiento de bases complementarias de Watson Crick, lo que da como resultado híbridos de ADN-ADN o híbridos de ADN-ARN que pueden detectar genes mutados o identificar el gen de interés requerido. Las secuencias de ADN monocatenario, las secuencias de ADN bicatenario, las secuencias de ARN monocatenario o las secuencias de oligonucleótidos sintéticos se utilizan como sondas durante la técnica de hibridación, y estas sondas se marcan con fósforo radiactivo en su extremo 5' para los procedimientos de identificación mediante autorradiografía o se marcan con colorantes fluorescentes.. Hay diferentes tipos de técnicas ISH disponibles según el tipo de sonda utilizada y el tipo de técnica de visualización seguida.
Figura 01: Hibridación fluorescente in situ
Hay muchas aplicaciones de ISH, principalmente en el diagnóstico molecular de enfermedades infecciosas para identificar la presencia de patógenos y confirmar el patógeno a través del diagnóstico molecular. También se utiliza en los campos de la biología del desarrollo, el cariotipo y el análisis filogenético y el mapeo físico de los cromosomas.
¿Qué es la inmunohistoquímica (IHC)?
En la técnica de IHC, la principal molécula analizada es el antígeno. Durante la IHC, se utilizan anticuerpos monoclonales y policlonales para determinar la presencia de antígenos tras la infección o el estado de proliferación de células malignas. La técnica se basa en la unión antígeno-anticuerpo y para esta técnica se utilizan marcadores enzimáticos; una de esas aplicaciones es ELISA (ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas). Los marcadores también pueden ser anticuerpos marcados con fluorescencia o anticuerpos radiomarcados.
Figura 02: Inmunohistoquímica
IHC se usa ampliamente para la detección de células cancerosas. Los procedimientos de diagnóstico se dirigen a los antígenos presentes en las células tumorales para identificar y caracterizar el tumor. El mismo procedimiento se incorpora para el diagnóstico de agentes infecciosos. Los anticuerpos monoclonales y policlonales también se utilizan para analizar diferentes productos génicos al permitir la reacción de unión antígeno-anticuerpo entre la proteína deseada y el anticuerpo sintético administrado.
¿Cuáles son las similitudes entre la hibridación in situ y la inmunohistoquímica?
- ISH e IHC son reacciones muy específicas.
- Ambas técnicas son muy precisas.
- Ambas técnicas se pueden utilizar en el diagnóstico de cáncer y enfermedades infecciosas.
- Estas técnicas se realizan en ambientes estériles in vitro.
- Ambas son técnicas rápidas que proporcionan resultados reproducibles.
- ISH e IHC utilizan métodos de detección como técnicas de marcado por radio y fluorescencia.
¿Cuál es la diferencia entre la hibridación in situ y la inmunohistoquímica?
Hibridación in situ frente a inmunohistoquímica |
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| ISH es una técnica de hibridación de ácidos nucleicos que se realiza directamente en una porción o sección de tejido o en todo el tejido. | IHC es una técnica en la que se utilizan anticuerpos monoclonales y policlonales para determinar la presencia de antígenos, que son marcadores proteicos especiales colocados en las superficies celulares. |
| Tipo de biomoléculas analizadas | |
| ISH analiza los ácidos nucleicos. | IHC analiza proteínas-antígenos. |
| Base de la reacción bioquímica | |
| En esta técnica se produce un emparejamiento de bases complementarias entre ADN-ADN o ADN-ARN. | Las interacciones antígeno-anticuerpo están implicadas en la inmunohistoquímica. |
| Métodos de detección ligados a enzimas | |
| Los métodos de detección ligados a enzimas no se pueden utilizar en ISH. | Los métodos de detección ligados a enzimas se pueden utilizar en IHC. |
Resumen: hibridación in situ frente a inmunohistoquímica
Los diagnósticos moleculares son métodos rápidos y confirmatorios que se pueden utilizar para identificar una enfermedad no transmisible como el cáncer o una enfermedad transmisible como el VIH o la tuberculosis en función de los marcadores moleculares presentes en las células que conducen a la manifestación de la enfermedad. Los marcadores moleculares pueden estar presentes en forma de proteínas expresadas oa nivel genético en base a lo cual se introducen diferentes técnicas novedosas para aumentar la eficiencia y son menos laboriosas, aunque estas técnicas tienen un alto costo. Así, la ISH depende de la formación de híbridos ADN-ADN o ADN-ARN, y la IHC depende de las reacciones específicas entre el anticuerpo y el antígeno. Esta es la diferencia entre la hibridación in situ.
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